| 研究課題/領域番号 |
09044246
|
|---|
| 研究機関 | 北海道大学 |
|---|
研究代表者 |
高田 賢蔵 北海道大学, 医学部, 教授 (30133721)
|
|---|
| 研究分担者 |
杉浦 亮 北海道大学, 医学部, 助手 (20241317)
今井 章介 北海道大学, 医学部, 講師 (60232592)
ビル サグデン ウィスコンシン大学, マカードル研究所, 副所長兼教授
ウォルフガング ハンマー ドイツ臨床分子生物学腫瘍遺伝学研究所, 部長
|
|---|
| キーワード | EBウイルス / 遺伝子治療 / ウイルスベクター |
|---|
| 研究概要 |
EBウイルスベクター増殖のためのパッケージング細胞開発を行った。EBウイルスDNAは約172キロ塩基対の長さである。EBウイルス産生に際してEBウイルスDNAがウイルス粒子内へパッケージングされるためには、ウイルスDNAのサイズは150-200塩基対(kbp)の範囲になければならないことが明らかとなっている。そこで、EBウイルス産生細胞株であるAkata細胞のウイルスDNAへ50キロ塩基対の長さの外来DNAを組み込んだ細胞クローンを作製した。得られた細胞では、ウイルス産生を誘導してもウイルスDNAが大きすぎるためパッケージングされず、感染性のウイルス粒子が産生されないことが期待される。このような細胞へEBウイルスの複製起点配列とパッケージングシグナル、外来遺伝子を含むDNAを導入すると、コンカテマ-を形成して、パッケージングに適当なサイズで切断されて、ウイルス粒子として産生される。現在までに得られた細胞は組み換えEBVに加えて野生株EBVを含むため、クローニングにより組み換えEBVのみを含む細胞クローンを分離中である。
|
