遺伝子治療のための安全なEBウイルスベクター系の確立

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09044246
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 高田 賢蔵 北海道大学, 医学部, 教授 (30133721)
• 研究分担者: 丸尾 聖爾 北海道大学, 医学部, 助手 (70292018) ; 今井 章介 北海道大学, 医学部, 助教授 (60232592) ; サグデン ビル ウィスコンシン大, マカードル研究所, 副所長兼教授 ; ウォルフガング ハンマー ドイツ臨床分子生物学, 腫瘍遺伝子研究所, 部長
• キーワード: EBウイルス / 遺伝子治療 / ウイルスベクター

研究概要

EBウイルス増殖のためのパッケージング細胞開発を行った。EBV DNAは約172キロ塩基対(kbp)の長さである。EBV産生に際してEBV DNAがウィルス粒子内ヘパッケージングされるためには、ウイルスDNAのサイズは150-200kbpの範囲になければならないことが明らかとなっている。そこで、EBV産生細胞株であるAkata細胞のウイルスDNAへ約50kbpの長さの外来DNAを組み込んだ。得られた細胞では、ウイルス産生を誘導してもウイルスDNAが大きすぎるためパッケージングされず、感染性のウイルス粒子が産生されないことが期待される。このような細胞へEBVの複製起点配列とパッケージングシグナル、外来遺伝子を含むDNAを導入すると、コンカテマーを形成して、パッケージングに適当なサイズで切断されて、ウイルス粒子中に取り込まれることを確認した。

研究成果

• [文献書誌] Nishikawa,J.: "EBV promotes epithelial cell growth in the absence of EBNA2 and LMP1 expression." J.Virol.73. 1286-1292 (1999)
• [文献書誌] Imai,S.: "Cell-to-cell contact as an efficient mode of Epstein-Barr virus infection of diverse human epithelial cells." J.Virol.72. 4371-4378 (1998)
• [文献書誌] Komano,J.: "Epstein-Barr virus contributes to the malignant phenotype and to apoptosis resistance in Burkitt's lymphoma cell line Akata." J.Virol.72. 9150-9156 (1998)
• [文献書誌] Sugawara,Y.: "Detection of EBV in hepatocellular carcinoma tissue:a novel EBV latency characterized by absence of EBER expression." Virology. (in press)
• [文献書誌] Torii,T.: "The truncated form of the Epstein-Barr virus LMP1 is dispensable or complimentable by the full-length form in virus infection and replication." Virology. 251. 273-278 (1998)
• [文献書誌] Mizugaki,Y.: "Detection of Epstein-Barr virus in oral papilloma." Jap.J.Cancer Res.89. 604-607 (1998)