循環器疾患に対する遺伝子治療

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09044299
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 荻原 俊男 大阪大学, 医学部, 教授 (60107042)
• 研究分担者: DZAU Victor ハーバード大学, 医学部, 教授 ; 森下 竜一 大阪大学, 医学部, 助手 (40291439) ; 金田 安史 細胞工学センター, 助教授 (10177537) ; 檜垣 實男 大阪大学, 医学部, 助教授 (70189744)
• キーワード: 遺伝子治療 / デコイ / アンチセンス / 再狭窄 / ベクター

研究概要

本年度の計画として1)遺伝子導入用ベクター開発と、2)動物モデルにおける遺伝子治療法の開発を目的としたが、センダイウイルスの膜融合能を利用したHVJ-リポソーム法が血管平滑筋細胞へのアンチセンスオリゴの導入に極めて優れており、そのメカニズムはHVJ-リポソーム法により細胞質に直接オリゴが導入されるためであることをDzauらと共同研究において明らかにした。また、HVJ-リポソーム法は培養細胞に限らず生体心臓への遺伝子導入法としても極めて優れていることも報告し、心外膜へのHVJ-リポソームの貯留により逆行的に心筋細胞へ遺伝子導入が可能であり、将来的にヒトへの応用も可能であることを明らかにした(Dzauと共同研究による)。
動物モデルにおける遺伝子治療法の開発に関しては、ラット心臓にヒト肝細胞増殖因子(HGF)遺伝子をHVJ-リポソーム法により導入した結果、外因性HGF産生増加に伴い新生血管が認められた。更に、血流量も増加しており、心筋梗塞の有効な遺伝子治療ストラテジーであることを明らかにした。また、冠動脈バイパス術後再狭窄に対する遺伝子治療の検討として、がん抑制遺伝子p21をウサギベイングラフトに導入した結果、ベイングラフトの再狭窄が抑制された。また、そのメカニズムとして細胞周期抑制による平滑筋細胞の表現系の胎児型から成人型への変換と細胞死(特にアポトーシス)誘導によるものであることを明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Morishita R: "Molecular delivery system for antisense olgonucleotides:enhanced effectiveness of antisense oligonucleotides by HVJ-liposome mediated transf" Journal of Cardiovascular Pharmacology & Therapeutics. 2. 213-222 (1996)
• [文献書誌] Aoki M: "Efficient in vivo gene transfer into heart in rat myocardial infarction model using HVJ(Hemagglutinating Virus of Japan)-liposome method." Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 29. 949-959 (1997)
• [文献書誌] Morishita R: "In Vivo Transfection of cis element "decoy" against NFkB binding site prevented myocardial infarction as gone therapy." Nature Medicine. 3. 894-899 (1997)
• [文献書誌] Suzuki J: "Prevention of graft coronary arteriosclerosis by antisense cdk 2 kinase oligonucleotide." Nature Medicine. 3. 900-903 (1997)
• [文献書誌] Sawa Y: "A novel strategy for myocardial protection using in vivo transfection of cis element "decoy" against NFkB binding site:evidence for a role of NFkB in ischemic-reperfus injury." Circulation. 96. 280-285 (1997)
• [文献書誌] Morishita R: "Role of AP-1 complex in angiotensin II-mediated transforming growth factor-β expression and growth of smooth muscles cells:using decoy approach against AP-1 binding site" Biochemical Biophysics Research Communication. (in press).
• [文献書誌] Morishita R: "Ischemic Heart" Kluwer Academic Publishers (in press),
• [文献書誌] Morishita R: "Angiotensin II receptor blockade:physiological and clinical implications" Kluwer Academic Pub (in press), (1997)