フィブリノゲンの構造と機能の分子機作-遺伝的変異分子の解析とその応用

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09044329
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 松田 道生 自治医科大学, 医学部, 教授 (50048980)
• 研究分担者: WEISEL John ペンシルバニア大学, 医学部, 教授 ; 朝倉 伸司 自治医科大学, 医学部, 講師 (70245033) ; 三室 淳 自治医科大学, 医学部, 講師 (10221607) ; 諏合 輝子 自治医科大学, 医学部, 講師 (60183844) ; 坂田 洋一 自治医科大学, 医学部, 助教授 (40129028)
• キーワード: 異常フィブリノゲン / フィブリンの電顕像 / 余剰糖付加 / 架橋結合 / 血栓症

研究概要

1.遺伝性異常fibrinogen(Fbg)の構造・機能解析:国内・外から10余家系の異常分子を入手して構造及びその機能障害との関係を分析し,完了したものを逐次報告した(研究発表1,2,8).これらの中で特記すべきものとして,ドイツのMarburg大学(Prof.R.Egbring)から送付されて来たFibrinogen(Fbg)Marburgである.この異常FbgはAα鎖遺伝子上でstop codonが早期に出現するため,Aα鎖は150アミノ酸だけ短い.この結果ジスルフィド結合の相手を失ったAα Cys-442の一部には血清albumin(Alb)がジスルフィド結合している.活性型第XIII因子(XIIIa)存在下にトロンビンによってFbnに転換すると,このAlbの一部がXIIIaの基質として別のFbn分子のγ鎖に架橋結合する.また,形成されるFbn塊はプラスミンによって全く溶解されない.国内からの異常分子中,Fbg Niigataでは新型の点変異(Bβ Asn 160→Ser)と,これにより新たに形成された糖付加配列の為にBβ Asn 158に2分岐アンテナ様構造を持つ糖鎖が証明された.この変異部は重合反応基から離れているので,機能障害との関連を分析中である.
2.異常分子の電顕学的分析:これまでに解析した異常分子の中から代表的な検体を選び,米国の共同研究者(Mosesson,Weisel両教授)と電顕による超微細構造の分析を進めている.Fbg Marburgでは形成されるfibrin(Fbn)網は極めて細くしかも分岐に富む線維から成り,網目構造は緊密で水透過性が極度に不良である.血栓症と創傷治癒不全との関連から興味深い所見である.糖除去したFbg NiigataではFbn線維が異常に太く,分岐は殆ど消失した.Fbg Kurashiki(γ Glu268→Gly)ではFbn分子間で縦列に進む重合が不良で,Fbn網は粗でしかも不規則である.しかし,22.5nmの幅を持つ縞状模様は正常に観察される.これらの成績がまとまり次第報告する予定である.

研究成果

• [文献書誌] YAMAGUCHI, Shu-ichi: "Fibrinogen Kumamoto with an Aα Arg-19 to Glysubstitution has reduced a affinity for thrombin : Possible relevance to thrombosis." Jpn.J.Thromb.Hemost.8(5). 382-392 (1997)
• [文献書誌] 坂田 宏: "急性リンパ性白血病の経過中に発見された先天性フィブリノーゲン異常症(fibrinogen Asahikawa II)の1例" 日本小児血液学会雑誌. 11(6). 441-444 (1997)
• [文献書誌] ASAKURA, Shinji: "Fibroblasts spread on immobilized fibrin monomer by mobilizing a β1-classitegrin,together with a vitronectin receptor αv β3 on their surface." J.Biol.Chem.272(13). 8824-8829 (1997)
• [文献書誌] 松田 道生: "フィブリノゲンの誘導体,とくに可溶性フィブリンとDダイマーについて:その2.Dダイマーについて" 日本血栓止血学会誌. 8(3). 204-211 (1997)
• [文献書誌] Pfitzner, A.Susanne: "Fibrin detected in plasma of patients with disseminated intravascular coagulation by fibrin-specific antibodies consists primarily of high molecular weight factor XIIIa-crosslinked and plasmin-modified complexes partially containing fibrinopeptide A." Thromb.Haemost.78. 1069-1078 (1997)
• [文献書誌] 松田 道生: "余剰糖鎖を付加された遺伝性異常フィブリノゲン" 日本血栓止血学会誌. 9(1). 71-76 (1998)
• [文献書誌] SUGO, Teruko: "The disulfide-linked albumin to the Marburg fibringoen A α-chain serves as substrate for factor XIIIa : Possible relevance to the resistance against plasmin of cross-linked fibrin." Blood. (in press).