1997 年度実績報告書

悪性黒色腫に発現する融合症遺伝子EWS/ATF1の癌化機構における役割の解明

研究課題

研究課題/領域番号	09254225
研究機関	東京医科歯科大学
研究代表者	萩原正敏東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (10208423)
キーワード	CREB / ATF1 / 増殖関連遺伝子 / CRE / E1A
研究概要	我々は以前よりcAMP依存性に増殖する細胞株の分子機構に注目し、cAMP反応性エレメント結合蛋白CREB/ATF1によって制御される増殖関連遺伝子の同定を試みてきた。最近、Zucmanらにより悪性黒色腫の一部(MMSP)においてEwing肉腫癌遺伝子EMS)が転写因子ATF1と融合遺伝子を形成していることが判明しており、細胞増殖機構において、CREB/ATF1が果たす役割に注目が集まっている。実際、PCNA(増殖性細胞特異的核抗原)やcyclinAのプロモーター領域にはCREが存在する。 ATF1ロイシンジッパー中のArgをLeuに点突然変異させることによってATF1ドミナントネガティブ分子を作製した。このミュータント蛋白(ATF1RL)は野生型CREBとヘテロダイマーを形成するがDNA結合できないのでCREBドミナントネガティブとして作用するこたが明らかとなった。実際、PC12細胞でATF1RLを過剰発現させると、CRE結合能が低下し、PC12細胞のcAMPによる神経突起伸張が抑制された。そこで、E1Aをtransfectしてtransformしたヒト腎由来の293細胞に、ATF1RL発現ベクターを導入して、細胞増殖に対する影響を調べた。その結果、ATF1RLの過剰発現は293細胞の形態にも、増殖能にも影響を与えなかった。ATF1RLはCREBによる転写活性化は抑制できるが、ARF1による活性化には影響がないため、E1Aの下流の増殖制御カスケードはCREBではなく、ATF1によって制御を受けていることを示唆している。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Kamimoto,T., Nagai,Y., et al.: "Dymple,a Novel Dynamin-like High Molecular Weight GTPase Lacking a Proline-rich Carboxyl-terminal Domain in Mammalian Cells." J.Biol.Chem.273(2). 1044-1051 (1998)
[文献書誌] Shimomura,A., Okamoto,Y., et al.: "Dominant Negative ATF1 Blocks Cyclic AMP-Induced Neurite Outgrowth in OC12D Cells." J.Neurochem.(in press).
[文献書誌] Kuroyanagi,N., Onogi,H., et al.: "Novel SR-protein-specific kinase,SRPK2,disassembles nuclear speckles." Biochemical and Biophysical Research Communications.(in press).
[文献書誌] Watsuji,T., Okamoto,Y., et al.: "Controlled gene expression with a reverse tetracycline regulated retroviral vector (RTRV) system." Biochem.Biophys.Res.Commun. 234(3). 769-773 (1997)
[文献書誌] Watanabe,Y., Takaetsu,G., et al.: "Characterization of a Serum Response Factor-Like Protein in Saccharomyces cerevisiae,Rlm1,Which Has Transcriptional Activity Regulated by the Mpk1 (Slt2) Mitogen-Activated Protein Kinase Pathway." Mol.Cell.Biol.17(5). 2615-2623 (1997)
[文献書誌] Kobayashi,M, Shimomura,A et al: "Phosphorylation of ATF-1 enhances its DNA binding and transcription of the Na,K-ATPase al subunit gene promotor." Research Nucleic Acid. 25(4). 877-882 (1997)

1997 年度 実績報告書

悪性黒色腫に発現する融合症遺伝子EWS/ATF1の癌化機構における役割の解明

研究代表者

萩原 正敏 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (10208423)

研究成果

[文献書誌] Kamimoto,T., Nagai,Y., et al.: "Dymple,a Novel Dynamin-like High Molecular Weight GTPase Lacking a Proline-rich Carboxyl-terminal Domain in Mammalian Cells." J.Biol.Chem.273(2). 1044-1051 (1998)

[文献書誌] Shimomura,A., Okamoto,Y., et al.: "Dominant Negative ATF1 Blocks Cyclic AMP-Induced Neurite Outgrowth in OC12D Cells." J.Neurochem.(in press).

[文献書誌] Kuroyanagi,N., Onogi,H., et al.: "Novel SR-protein-specific kinase,SRPK2,disassembles nuclear speckles." Biochemical and Biophysical Research Communications.(in press).

[文献書誌] Watsuji,T., Okamoto,Y., et al.: "Controlled gene expression with a reverse tetracycline regulated retroviral vector (RTRV) system." Biochem.Biophys.Res.Commun. 234(3). 769-773 (1997)

[文献書誌] Watanabe,Y., Takaetsu,G., et al.: "Characterization of a Serum Response Factor-Like Protein in Saccharomyces cerevisiae,Rlm1,Which Has Transcriptional Activity Regulated by the Mpk1 (Slt2) Mitogen-Activated Protein Kinase Pathway." Mol.Cell.Biol.17(5). 2615-2623 (1997)

[文献書誌] Kobayashi,M, Shimomura,A et al: "Phosphorylation of ATF-1 enhances its DNA binding and transcription of the Na,K-ATPase al subunit gene promotor." Research Nucleic Acid. 25(4). 877-882 (1997)

1997 年度実績報告書

萩原正敏東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (10208423)