紫外線照射と増殖阻止に伴って誘導されてくるGADD遺伝子群の機能的役割

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09254260
• 研究機関: 兵庫医科大学
• 研究代表者: 審良 静男 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (50192919)
• キーワード: MyD118 / gadd34 / ノックアウトマウス / プロテインホスファターゼ / DNA障害 / 細胞増殖 / アポトーシス

研究概要

紫外線やX線などにより染色体DNAが損傷を受けた場合細胞の増殖が細胞周期のG1期またはG2期で一時停止される。この間に損傷したDNAは修復され変異を残したままDNAが複製されることが阻止される。1988年にFornaceらは、チャイニーズハムスター由来のCHO細胞を用いて、紫外線照射によって誘導される20個以上のcDNAをクローニングした。そのうち、gadd34,gadd45,gadd153は、紫外線以外にもDNAアルキル化剤であるmethylmethane sulfonate、電離放射線、過酸化水素によって著明に誘導されてくる。また、マウス骨髄性白血病M1細胞をIL-6で刺激した際に誘導されるMyD116はgadd34のマウスホモローグであり、MyD118はp53のターゲットであるgadd45と極めてホモロジーが高い。本研究では、MyD116/gadd34の遺伝子欠損マウスを作製しin vivoでの役割を調べるとともにMyD116/gadd34に結合する蛋白を同定し、機能的役割を解析することを目的とした。MyD116/gadd34のC末部をbaitに酵母two hybridシステムを用いてMyD116/gadd34と相互作用する分子をスクリーニングしたところprotein phosphatase type I(PPI)が得られた。MyD116/gadd34の細胞増殖抑制およびアポトーシス誘導のメカニズムがなんらかの分子を脱リン酸化することにより作用している可能性が示唆された。In vivoでのMyD116/gadd34の役割を検討するためMyD116/gadd34ノックアウトマウスを作製した。MyD116/gadd34ノックアウトマウスは、正常に生まれてきた。現在、DNA障害やストレスにともなう細胞増殖阻止やアポトーシスに異常がみられないかどうか検討中である。

研究成果

• [文献書誌] Inoue,M.: "The amino acid residues immediately carboxyl-terminal to the tyrosine phosphorylation site contribute to interleukin-6-specific activation of signal transducer and activator of transcription 3." J.Biol.Chem.272. 9550-9555 (1997)
• [文献書誌] Takeda,K.: "Targeted disruption of the mouse Stat3 gene leads to early embryonic lethality." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 94. 3801-3804 (1997)
• [文献書誌] Naka,T.: "Structure and function of a new STAT-induced STAT inhibitor." Nature. 387. 924-929 (1997)
• [文献書誌] Akira,S.: "NF-IL6 and NF-kB in cytokine gene regulation." Advances in Immunology. 65. 1-46 (1997)
• [文献書誌] Tanaka,T.: "Defective adipocyte differentiation in mice lacking C/EBPβ and C/EBPδ." EMBO J.16. 7432-7443 (1997)
• [文献書誌] Kawai,T.: "ZIP-kinase,a novel serin/threonine kinase which mediates apoptosis." Mol.Cell.Biol.(in press). (1998)
• [文献書誌] Takeda,K.: "Defective NK cell activity and Thl response in IL-18-deficient mice." Immunity. (in press). (1998)