ヒト癌退縮抗原 SART-1 分子の解析

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09255261
• 研究機関: 久留米大学
• 研究代表者: 七條 茂樹 久留米大学, 医学部, 助教授 (30080592)
• 研究分担者: 伊東 恭悟 久留米大学, 医学部, 教授 (50125499) ; 山名 秀明 久留米大学, 医学部, 助教授 (30140669)
• キーワード: 食道癌 / cytotoxic T-cell(CTL) / 抗原ペプチド / (SART-1) / gene-expression cloning法 / ロイシンジッパー・モチーフ / 細胞周期依存性 / bicistronic gene

研究概要

食道癌患者の末梢血から自家癌特異的cytotoxic T-cell(CTL)を増やすことに成功し、このCTLが認識する抗原ペプチドをコードする遺伝子、squamous cell carcinoma antigen recognized by T-cell 1(SART-1、GenBank accession number: AB006198)をgene-expression cloning法(Boon T et al)により得た。この遺伝子は、正常細胞も含めて調べた限り全ての細胞で、2.6kbの長さのmRNAとして発現し、核移行シグナル、ロイシンジッパー・モチーフを持つ800アミノ酸残基からなるタンパク質をコードしていることが示唆された。ウエスタンブロットで解析したところ、このタンパク質は正常非増殖性細胞では検出されないが、精巣、胎児肝臓、および増殖細胞(正常細胞も含む)に発現していた。また、DNA結合能を有する核内タンパクで、細胞周期依存性(M期で主に発現)が認められた。一方、扁平上皮癌や腺癌では、43kdのタンパク質も同時に翻訳され(bicistronic gene)、これが癌抗原になっている事が示唆された。また、胎児肝や精巣以外の正常細胞や組織では発現せず、また腫瘍の中でも白血病細胞、メラノーマでは検出できなかった。HLA-A2601拘束性に認識されるペプチド抗原は、KGSGKMKTEであることが示唆され、さらにこのペプチドを用いて、in vitroで自家癌特異的CTLが誘導できた。しかし、このペプチドをワクチンとして用いることができるかどうかは、動物実験での有害事象の検討、in vivoでのCTLの誘導実験、アジュバントの種類、投与量、投与方法など、多くの検討を要する。

研究成果

• [文献書誌] Iwamoto O,: "Detection of MAGE-4 protein in sera of patients with head and neck squamous cell carcinoma." Int.J.Cancer,. 70. 287-290 (1997)
• [文献書誌] Shichijo S,: "Detection of MAGE-4 protein in sera of lung cancer patients." Jpn.J.Cancer Res.,. 88. 414-419 (1997)
• [文献書誌] Itoh K,: "Development of cancer vaccine by tumor rejection antigens." Intern.Rev.Immunol.,. 14,. 153-171 (1997)
• [文献書誌] Tsuzurahara S,: "Detectionof MAGE-4 protein in the sera of patients with Hepatitis-C virus-associated hepatocellular carcinoma and liver cirrhosis." Jpn.J.Cancer Res,. 88(9),. 915-918 (1997)
• [文献書誌] 七條茂樹: "ペプタイドト腫瘍免疫「基礎編」、" 癌治療と宿主. 9(4),. 117-124 (1997)
• [文献書誌] shichijo S,: "A gene encoding antigenic peptides of human squamous cell carcinoma recognized by cytotoxic T lymphocytes." J.Exp.Med.,. 187(3),. 277-288 (1998)