1997 年度実績報告書

シナプス可塑性に関わる神経ペプチド遺伝子の転写制御と転写因子

研究課題

研究課題/領域番号	09259222
研究機関	新潟大学
研究代表者	樋口宗史新潟大学, 医学部, 教授 (30150337)
研究分担者	三木直正大阪大学, 医学部, 教授 (40094445)
キーワード	neuropeptide Y / enkephalin A / calmodulin / NGF / depolarization / differentiation / NDF1 / transcription factor
研究概要	本研究では、中枢神経に最も豊富にかつ神経特異的に発現するNPYおよびEnkephalin A遺伝子を用いて、シナプス可塑性に関わる神経ペプチド遺伝子の転写活性化の制御機構の解明と、その特異的転写制御因子の同定を、分子生物学的・薬理学的手法で行った。これまで、NPY及びENK神経ペプチド遺伝子プロモーター上のNGF反応エレメント(NGFRE)やCa/calmodulin-dependent kinase反応エレメント(CaRE)を同定した。これらのエレメントを含んだCATベクターやDNAアフィニティーカラムを準備し、転写実験や因子の精製に用いている。また、Southwestern法によって、神経細胞cDNAライブラリーから転写制御因子のクローニングを行った。シナプス可塑性に関わる、神経活動による神経ペプチド遺伝子の発現増加がこれら2つの反応エレメントを介した転写活性の増加である事と、それに関与する転写因子について興味あるデータを得た。平成9年度は、特にNPY遺伝子のNGFREに結合する種々の転写因子のうち、どの転写因子がNGFによる細胞内情報伝達を伝えているのかを、CATベクターを用いた培養PC12細胞での発現実験で解析した。NGFRE結合蛋白質として26kDaのカプサイシン結合核蛋白質をクローニングし、このNDF1の機能解析実験として、NDF1 cDNAのPC12細胞での一過性および恒常的発現実験を行ない、NDF1が交感神経への分化の制御に働くことを見出した。この因子の活性は神経作用薬Capsicinの調節を受けると予想され、その薬物の作用機構を追及中である。 NDF1の交感神経と中枢神経系での分布を調べる実験も行った。26kDa核蛋白質NDF1 mRNAはIn situ hybridization法により神経系に広範に存在することを見いだした。更に、この因子は神経発生に伴い、胎生時期E18に極大をとる、著しい発現の変化を示す。このことはNDF1の神経分化での生理的役割を強く示唆していた。

研究成果
(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Y. Tsukamoto: "Gicerin, a cell adhesion molecule, participates in the histogenesis of retina." J. Neurobiol. 33. 769-780 (1997)
[文献書誌] H. Tanaka: "Analysis of the T β γ-binding domain of MEKA/phosducin." Neurochem. Int.31. 625-634 (1997)
[文献書誌] Y. Ding: "Characterization of a nuclear factor that enhances DNA binding activity of ssCRE-BP/pur α, a single-stranded DNA binding protein." Neurochem. Int.31. 45-54 (1997)
[文献書誌] 樋口宗史: "シグナルトランスダクションテラピー-細胞内シグナルトランスダクション研究の進歩と薬理学" 精神神経薬理. 19. 1-12 (1997)
[文献書誌] 樋口宗史: "神経ペプチド(NPY)の生理機能と遺伝子発現" 蛋白質核酸酵素. 42. 812-824 (1997)
[文献書誌] 乾明夫: "Neuropeptide Y (NPY)" Molecular Medicine「ノックアウトマウス・データブック」. 34. 356-357 (1997)
[文献書誌] 樋口宗史: "「神経細胞核への情報伝達と神経遺伝子発現」生物学的精神医学シリーズ第14巻「脳シグナルカスケードと精神疾患」" 学会出版センター, 23 (1997)
[文献書誌] 樋口宗史: "「mRNAの精製法とハイブリダイゼーション」ニューロサイエンス講座第3巻「新しい神経伝達研究法」" 広川書店(印刷中), (1998)

1997 年度 実績報告書

シナプス可塑性に関わる神経ペプチド遺伝子の転写制御と転写因子

研究代表者

樋口 宗史 新潟大学, 医学部, 教授 (30150337)

研究成果

[文献書誌] Y. Tsukamoto: "Gicerin, a cell adhesion molecule, participates in the histogenesis of retina." J. Neurobiol. 33. 769-780 (1997)

[文献書誌] H. Tanaka: "Analysis of the T β γ-binding domain of MEKA/phosducin." Neurochem. Int.31. 625-634 (1997)

[文献書誌] Y. Ding: "Characterization of a nuclear factor that enhances DNA binding activity of ssCRE-BP/pur α, a single-stranded DNA binding protein." Neurochem. Int.31. 45-54 (1997)

[文献書誌] 樋口宗史: "シグナルトランスダクションテラピー-細胞内シグナルトランスダクション研究の進歩と薬理学" 精神神経薬理. 19. 1-12 (1997)

[文献書誌] 樋口宗史: "神経ペプチド(NPY)の生理機能と遺伝子発現" 蛋白質核酸酵素. 42. 812-824 (1997)

[文献書誌] 乾 明夫: "Neuropeptide Y (NPY)" Molecular Medicine「ノックアウトマウス・データブック」. 34. 356-357 (1997)

[文献書誌] 樋口宗史: "「神経細胞核への情報伝達と神経遺伝子発現」 生物学的精神医学シリーズ 第14巻「脳シグナルカスケードと精神疾患」" 学会出版センター, 23 (1997)

[文献書誌] 樋口宗史: "「mRNAの精製法とハイブリダイゼーション」 ニューロサイエンス講座 第3巻「新しい神経伝達研究法」" 広川書店(印刷中), (1998)

1997 年度実績報告書

樋口宗史新潟大学, 医学部, 教授 (30150337)

[文献書誌] 乾明夫: "Neuropeptide Y (NPY)" Molecular Medicine「ノックアウトマウス・データブック」. 34. 356-357 (1997)

[文献書誌] 樋口宗史: "「神経細胞核への情報伝達と神経遺伝子発現」生物学的精神医学シリーズ第14巻「脳シグナルカスケードと精神疾患」" 学会出版センター, 23 (1997)

[文献書誌] 樋口宗史: "「mRNAの精製法とハイブリダイゼーション」ニューロサイエンス講座第3巻「新しい神経伝達研究法」" 広川書店(印刷中), (1998)