1997 年度実績報告書

Ncxノックアウトマウスにおける巨大結腸症と神経細胞死

研究課題

研究課題/領域番号	09280206
研究機関	千葉大学
研究代表者	幡野雅彦千葉大学, 医学部, 助教授 (20208523)
研究分担者	岡田誠治千葉大学, 医学部, 助手 (50282455) 徳久剛史千葉大学, 医学部, 教授 (20134364)
キーワード	Ncx / ノックアウトマウス / NID / 腸管神経節 / 神経細胞死 / Caspase3
研究概要	Ncxノックアウト(KO)マウスでは、生後3〜4週で巨大結腸症を示した。しかし従来のヒトHirschsprung病は腸管神経節の神経細胞が欠如しているのに対し、このKOマウスにおいては神経細胞の数がコントロールに比べて約2倍に増加しており、ヒトNeuronal Intestinal Dysplasia(NID)のモデルと考えられる。本研究ではNcxKOマウスにおける神経細胞数の増加の機序を明らかにした。細胞増殖について細胞核へのBrdUのとりこみを指標とした組織化学的検索を行なったが、両者では差が見られなかった。そこで、TUNEL法により腸管神経節の神経細胞死を解析したところ、コントロールマウスの腸管では、生後1〜2週頃に細胞死が生じているのに対し、KOマウスではそれが認められなかった。そこで腸管神経節における細胞死関連遺伝子(Bcl-2ファミリー、Caspaseファミリー)の発現についてRT-PCRおよび免疫組織染色により検討したところ、Bcl-2,Bcl-xl,BaxなどのBcl-2ファミリー遺伝子の発現は両者に差は認められなかった。一方Caspase1(ICE)の発現はコントロールおよびKOマウスの間で差は見られなかったが、Caspase3(CPP32)の発現はKOマウスにおいて著明に減少していた。これらの結果より、Ncxは神経堤細胞が神経細胞に分化後の細胞死の誘導に関与していることが示唆され、直接あるいは間接的にCaspase3の発現を制御していると考えられた。一方ヒトNID患者でのNCX遺伝子の変異を調べるためにヒトNCXの遺伝子構造を決定した。現在患者DNAについてSSCP法などを用いて変異を解析している。

研究成果

(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Kobayashi,K.: "Overexpression of c-fos inhibits down-regulation of a cyclin-dependent kinase-inhibitor p27Kip1 in splenic B cells activated by surface Lg crosslinking." J.Immunol.158. 2050-2056 (1997)
[文献書誌] Hatano,M.: "Ncx,a Hox11 related gene,is expressed in a variety of tissues derived from neural crest cells." Anat.Embryol.195. 419-425 (1997)
[文献書誌] Fukuda,T.: "Bcl-6 is essential for germinal center formetion." J.Exp.Med.186. 439-448 (1997)
[文献書誌] Hatano,M.: "A novel pathogenesis of megacolon in Ncx/Hox11L.1 deficient mice." J.Clin.Invest.100. 795-801 (1997)
[文献書誌] Okada,S.: "A physiological role of Bcl-xL in activated macrophages." J.Immunol.(in press). (1998)
[文献書誌] Okabe,S.: "Bazf,a novel Bc16 homologue,functions as a transcriptional repressor." Mol.Cell.Biol.(in press). (1998)
[文献書誌] 幡野雅彦: "ノックアウトマウスデータブック" 黒川清、笹月健彦監修、野口茂、平井久丸編、中山書店, 2 (1997)

1997 年度 実績報告書

Ncxノックアウトマウスにおける巨大結腸症と神経細胞死

研究代表者

幡野 雅彦 千葉大学, 医学部, 助教授 (20208523)

研究成果

[文献書誌] Kobayashi,K.: "Overexpression of c-fos inhibits down-regulation of a cyclin-dependent kinase-inhibitor p27Kip1 in splenic B cells activated by surface Lg crosslinking." J.Immunol.158. 2050-2056 (1997)

[文献書誌] Hatano,M.: "Ncx,a Hox11 related gene,is expressed in a variety of tissues derived from neural crest cells." Anat.Embryol.195. 419-425 (1997)

[文献書誌] Fukuda,T.: "Bcl-6 is essential for germinal center formetion." J.Exp.Med.186. 439-448 (1997)

[文献書誌] Hatano,M.: "A novel pathogenesis of megacolon in Ncx/Hox11L.1 deficient mice." J.Clin.Invest.100. 795-801 (1997)

[文献書誌] Okada,S.: "A physiological role of Bcl-xL in activated macrophages." J.Immunol.(in press). (1998)

[文献書誌] Okabe,S.: "Bazf,a novel Bc16 homologue,functions as a transcriptional repressor." Mol.Cell.Biol.(in press). (1998)

[文献書誌] 幡野雅彦: "ノックアウトマウスデータブック" 黒川 清、笹月健彦監修、野口 茂、平井久丸編、中山書店, 2 (1997)

1997 年度実績報告書

幡野雅彦千葉大学, 医学部, 助教授 (20208523)

[文献書誌] 幡野雅彦: "ノックアウトマウスデータブック" 黒川清、笹月健彦監修、野口茂、平井久丸編、中山書店, 2 (1997)