1997 年度実績報告書

リゾチーム遺伝子を導入した青枯れ病抵抗性トランスジェニック・ナス科作物の育種

研究課題

研究課題/領域番号	09356002
研究種目	基盤研究(A)
研究機関	岡山大学
研究代表者	山田哲治岡山大学, 農学部, 教授 (00191320)
研究分担者	一瀬勇規岡山大学, 農学部, 助教授 (50213004) 田原誠岡山大学, 農学部, 助教授 (50274014) 田中博日本たばこ二葉たばこ研究所, 主任研究員
キーワード	リゾチーム / 青枯れ病 / ナス科植物 / 遺伝子組換え
研究概要	本研究は、ナス科植物の青枯れ病・立枯病の防除には、化学的な方法、耕種的な方法および抵抗性品種の導入などが用いられてきたが、被害を皆無にするような防除方法は確立されていない。そこで申請者らは、研究協力者らによってその遺伝子構造・諸性質が明らかにされたタバコ立枯病細菌感染ファージP4282からリゾチーム遺伝子を同定・単離し、さらに申請者らが永年に渡って研究してきた根組織特異的に発現するエンドウ・PAL(フェニールアラニンアンモニアリアーゼ)遺伝子のプロモータを利用し、ファージ・リゾチーム遺伝子とPALプロモータを連結したキメラ遺伝子をトマト・タバコ植物体に導入して、青枯れ・立枯れ病抵抗性トランスジェニック植物体を作出することを目的としている. 1)ファージP4282のリゾチーム遺伝子のクローニングファージP4284を感染させた青枯れ病細菌の溶菌培地懸濁液の上清に含まれるタンパク質を電気泳動分画した後、リゾチーム活性を示すタンパク質バンドを活性染色により同定したところ、約70kDaのタンパク質であることが判明した。また、本タンパク質をゲルから抽出・精製後、アミノ酸シークエンサーで、N-末端アミド酸シークエンスを決定し、遺伝子クローニング用のオリゴヌクレオチドプローブを作製した。 2)エンドウPAL(PSPAL2を中心として)プロモータとリゾチーム遺伝子を連結したキメラ遺伝子の構築代表者らが同定・開発したエンドウPALプロモータの根組織特異的発現に必要なDNAシス領域を絞り込むと同時に、傷、紫外線照射、菌感染などによる環境ストレス応答に必要なシス領域を詳細に解析し、コンパクトで、かつ遺伝子発現のon/off調節のきくユニークな植物用プロモータのいくつかの種類を作製した。現在、これらのプロモータのタバコ植物体における器官特異的発現と病原菌接種による発現様式をGUSをレポータ遺伝子として、解析している。

研究成果

(13件)

すべてその他

すべて文献書誌 (13件)

[文献書誌] Seki et al.: "Combined effects of multiplecis elements in elicitor-mediated activation of PSCHS1 gene." Plant Cell Physiol. 38. 96-100 (1997)
[文献書誌] Tanaka et al.: "dad-1,a putative programmed cell death suppressor gene in rice." Plant Cell Physiol. 38. 379-383 (1997)
[文献書誌] Ito et al.: "Molecular evolution and the functional relevance of the pea chalcone synthase genes." Mol.Gen.Genet. 255. 28-37 (1997)
[文献書誌] Kawamata et al.: "Temporal and spatial pattern of expression of the pea phenylalanine ammonia-lyase genel promoter in transgenic tobacco." Plant Cell Physiol. 38. 792-803 (1997)
[文献書誌] Amano et al.: "Association between ion fluxes and defense responses in pea ans cowpea tissues." Plant Cell Physiol. 38. 698-706 (1997)
[文献書誌] Kiba et al.: "Superoxide generation in extracts from isolated plant cell walls is regulated by fungal signal molecules." Phytopahol. 87. 846-852 (1997)
[文献書誌] Murakami,Y.et al.: "The effects of expression of procaryotic-type iaa genes in Agrobacterium tumefaciems on plant tumorigenicity." Ann.Phytopathol.Soc.Jpn.63. 377-380 (1997)
[文献書誌] Murakami,Y.et al.: "Functional analysis of the putative cis-elements involved in activation by elicitor and deactivation by suppressor in the promoter of a pea gene for phenylanine ammonia-lyase(PSPALI)." Plant Cell Physiol. 38. 1403-1408 (1997)
[文献書誌] Shiraishi,T.et al.: "Suppressons as a key factor for determination of host plants-pathogenicmicrobes specificity." Plant Microbe Interaction. (1997)
[文献書誌] Shiraishi,T.et al.: "The role of Suppressors in determining hasr-parasite specificities plant cells." International Review of Cytology. 172. 55-93 (1997)
[文献書誌] 山田哲治他: "植物化学調節植物の病害抵抗性機構-特にサプレッサーについて-" (1997)
[文献書誌] 山田哲治、島本功、渡辺雄一郎監修: "分子レベルから見た植物" (1997)
[文献書誌] 山田哲治他: "目で見る植物の耐病性、分子レベルからみた植物の耐病性" 秀油社、東京, (1997)

1997 年度 実績報告書

リゾチーム遺伝子を導入した青枯れ病抵抗性トランスジェニック・ナス科作物の育種

研究代表者

山田 哲治 岡山大学, 農学部, 教授 (00191320)

研究成果

[文献書誌] Seki et al.: "Combined effects of multiplecis elements in elicitor-mediated activation of PSCHS1 gene." Plant Cell Physiol. 38. 96-100 (1997)

[文献書誌] Tanaka et al.: "dad-1,a putative programmed cell death suppressor gene in rice." Plant Cell Physiol. 38. 379-383 (1997)

[文献書誌] Ito et al.: "Molecular evolution and the functional relevance of the pea chalcone synthase genes." Mol.Gen.Genet. 255. 28-37 (1997)

[文献書誌] Kawamata et al.: "Temporal and spatial pattern of expression of the pea phenylalanine ammonia-lyase genel promoter in transgenic tobacco." Plant Cell Physiol. 38. 792-803 (1997)

[文献書誌] Amano et al.: "Association between ion fluxes and defense responses in pea ans cowpea tissues." Plant Cell Physiol. 38. 698-706 (1997)

[文献書誌] Kiba et al.: "Superoxide generation in extracts from isolated plant cell walls is regulated by fungal signal molecules." Phytopahol. 87. 846-852 (1997)

[文献書誌] Murakami,Y.et al.: "The effects of expression of procaryotic-type iaa genes in Agrobacterium tumefaciems on plant tumorigenicity." Ann.Phytopathol.Soc.Jpn.63. 377-380 (1997)

[文献書誌] Murakami,Y.et al.: "Functional analysis of the putative cis-elements involved in activation by elicitor and deactivation by suppressor in the promoter of a pea gene for phenylanine ammonia-lyase(PSPALI)." Plant Cell Physiol. 38. 1403-1408 (1997)

[文献書誌] Shiraishi,T.et al.: "Suppressons as a key factor for determination of host plants-pathogenicmicrobes specificity." Plant Microbe Interaction. (1997)

[文献書誌] Shiraishi,T.et al.: "The role of Suppressors in determining hasr-parasite specificities plant cells." International Review of Cytology. 172. 55-93 (1997)

[文献書誌] 山田哲治 他: "植物化学調節 植物の病害抵抗性機構-特にサプレッサーについて-" (1997)

[文献書誌] 山田哲治、島本 功、渡辺雄一郎監修: "分子レベルから見た植物" (1997)

[文献書誌] 山田哲治 他: "目で見る植物の耐病性、分子レベルからみた植物の耐病性" 秀油社、東京, (1997)

1997 年度実績報告書

山田哲治岡山大学, 農学部, 教授 (00191320)

[文献書誌] 山田哲治他: "植物化学調節植物の病害抵抗性機構-特にサプレッサーについて-" (1997)

[文献書誌] 山田哲治、島本功、渡辺雄一郎監修: "分子レベルから見た植物" (1997)

[文献書誌] 山田哲治他: "目で見る植物の耐病性、分子レベルからみた植物の耐病性" 秀油社、東京, (1997)