| 研究課題/領域番号 |
09460131
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| 研究機関 | 近畿大学 |
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研究代表者 |
入谷 明 近畿大学, 生物理工学部, 教授 (80026385)
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| 研究分担者 |
宮本 祐史 近畿大学, 生物理工学部, 助手 (20271413)
松代 愛三 近畿大学, 生物理工学部, 教授 (00029753)
細井 美彦 近畿大学, 生物理工学部, 助教授 (70192739)
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| キーワード | インプリンティング遺伝子 / トランスジェニック動物 / マウス / ウサギ |
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| 研究概要 |
ゲノムインプリンティング(遺伝的刷り込み)遺伝子のーつであるmammalian achcate-scutehomologue2(Mash2)は、胎盤形成で重要な栄養外胚葉系列の発生に重要な役割を果たす最初の転写因子ではないかと考えられている(Guillmot et al.,Nature371:333,1994)。そこで、胎児の成長を促進する遺伝子が発現しているが胎盤形成が不完全なため発生途中で胚死する雄性発生胚に、胎盤形成に重要であるMash-2あるいはその近傍のH19を導入して強制発現させることによって、雄性発生胚を個体まで発生させることを目的に研究を進めている。
今年度は、動物組織で構成的発現を誘導することができるニワトリ・b-actinプロモーターとSV40のスプライシング領域およびポリA付加シグナル部位を含むベクターに、マウスMash2cDNAをに挿入させた導入用融合遺伝子を構築して、トランスジェニックマウスの作製を試みた。164個の受精卵に注入操作し、移植後最終的に29匹(18%)の産児が得られた。次にSouthern blot解析によって、導入遺伝子の染色体への取り込みを検討した所、全てのマウスにおいて遺伝子の取り込みが確認できなかった。この結果は、過剰発現させたMash2遺伝子によって致死的な作用が誘起されたのか不明であるが、現在、さらにトランスジェニックマウスの作製実験を進めている。また、ウサギの胎盤のcDNAライブラリーの作製を終えて、ウサギMash2cDNAの単離を行っている。
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