| 研究課題/領域番号 |
09460143
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 研究機関 | 帯広畜産大学 |
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研究代表者 |
五十嵐 郁男 帯広畜産大学, 原虫病分子免疫研究センター, 助教授 (80159582)
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| 研究分担者 |
岩倉 洋一郎 東京大学, 医科学研究所, 教授 (10089120)
斉藤 篤志 帯広畜産大学, 畜産学部, 教授 (10002263)
鈴木 直義 帯広畜産大学, 原虫病分子免疫研究センター, 名誉教授 (10003071)
長沢 秀行 帯広畜産大学, 原虫病分子免疫研究センター, 教授 (60172524)
豊田 裕 帯広畜産大学, 原虫病分子免疫研究センター, 教授 (90050418)
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| キーワード | マウスバベシア / ノックアウトマウス / サイトカイン / 防御抗原 / リコンビナント抗原 |
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| 研究概要 |
1.サイトカインノックアウトマウスの生産
IFN-γを欠損させたキメラマウスをそれぞれBALB/cマウスに7代バッククロスし、BALB/cマウスと同じ遺伝的背景を持つIFN-γノックアウトマウスを生産した。また、TNFRp55遺伝子を欠損させたキメラマウスをC57BL/6Jマウスにバッククロスし、C57BL/6Jマウスと同じ遺伝的背景を持つTNF-a-Rノックアウトマウスを生産した。これらのサイトカイン遺伝子が欠損していることをPCRを用いて確認し、感染実験に用いた。
2.サイトカインノックアウトマウスにおける感染実験
IFN-γノックアウトマウスおよびワイルドタイプのBALB/マウスcに B.microtiを感染させると、BALB/cマウスでは感染後3週間で原虫は血液中にみとめられなくなり、再攻撃感染に対して強い免疫能を示した。しかし、IFN-γノックアウトマウスでは感染40日後も原虫が血液中に認められ、感染防御効果も示されなかった。
TNFRp55ノックアウトおよびびワイルドタイプのC57BL/6Jマウスに B.rodhainiを感染させると、C57BL/6Jは感染後2週間で全例死亡したが、肝臓で巣状の壊死が認められた。しかし、TNFRp55ノックアウトでは半数のマウスが生残し、生き残ったマウスの肝臓の構造は正常であった。
3.B.rodhaini原虫のリコンビナント防御抗原の産生
B.rodhaini原虫の防御抗原をコードする遺伝子をPCRにより増幅し、大腸菌、バキュロウイルスに組み込み、リコンビナント防御抗原を産生させた。これらの抗原は B.rodhaini免疫血清と反応した。現在、これらの抗原でマウスを免疫し、その感染防御効果を検討中である。
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