| 研究概要 |
まず,代表的なアクロソームタンパク質であるアクロシン生体内機能をアクロシン欠損マウス精子を用いて調べた。卵透明帯への精子結合能には変化が見い出せなかったが,精子アクロソーム反応の際にアクロソームからのタンパク質の放出が顕著に遅れていることが判明した。したがって,アクロシンの生体内機能はアクロソーム反応時でのタンパク質内容物の放出の助長であると結論した。また,その放出されるタンパク質がアクロシンで限定分解されて,活性化や不活性化を起こしている可能性も見い出された。
アクロソームに含まれる精子の卵透明帯通過に関与する新規セリン系プロテーゼの探索を行い,4種類のプロテアーゼ遺伝子を同定・単離することができた。これら4種類のプロテアーゼが欠損するマウスを作製するために,ES細胞経由で遺伝子相同組換えを試みている(一部は終了)。
アクロシン遺伝子のプロモーター領域とクラゲ由来のグリーン蛍光タンパク質遺伝子を連結させて受精卵へ導入し,トランスジェニックマウスを作製した。この結果,アクロソームだけがグリーンに光る精子を産する変異マウスを得ることに成功し,非破壊的に受精での精子アクロソームの挙動を観察することに成功した。
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