エリスロポエチン受容体を介する増殖および分化シグナルの解明

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09470036
• 研究機関: 久留米大学
• 研究代表者: 吉村 昭彦 久留米大学, 分子生命科学研究所, 教授 (90182815)
• 研究分担者: 三澤 宏之 久留米大学, 分子生命科学研究所, 助手 (00289505) ; 大坪 素秋 久留米大学, 分子生命科学研究所, 助手 (10211799)
• キーワード: サイトカイン / JAK / STAT / SH2ドメイン / りん酸化 / 情報伝達 / チロシンキナーゼ / CISファミリー

研究概要

我々は多くのサイトカインによって共通に転写誘導される遺伝子としてSH2ドメインを有する新規遺伝子CIS(cytokine inducible SH2-protein)をクローニングした。さらに酵母two-hybrid systemによってJAK2のキナーゼドメインと直接結合しそのキナーゼ活性を抑制する分子JAB(JAK-binding protein)を見い出した。JABは構造的にCISに類似した分子であった。さらにデータベース検索の結果CISファミリーの存在が明らかとなり現在7つの遺伝子をクローニングした。これらのうちJABとCIS3はJAK2のチロシンキナーゼドメインに直接結合し、その活性を抑制することを見い出した。CIS3はJABに比べるとJAK2チロシンキナーゼドメインに対する親和性が低いものの、両者ともM1細胞に強制発現させた湯合IL6によるマクロファージ分化と増殖停止が起こらなかった。しかしながらJABがきわめて短時間にSTATの活性化を抑制するのに対し、ClS3はゆっくり抑制し、その結果シグナルが異なったモードで調節されていることがわかった。またCIS3とJABはインターフェロンに対する感受性が異なることを明らかにした。最近細胞をあるサイトカインで処理すると別のサイトカインに対する応答が低下することがいくつか報告されているが、それらの現象の一部はCISファミリー分子の誘導で説明可能と思われる。またJAK2の新しい基質となりうる分子APS(adaptor containing PH and SH2 domain)をクローニングしており今後サイトカインシグナルにおける役割を明らかにしたい。

研究成果

• [文献書誌] Endo,A.T.,et al: "A new protein containing an SH2 domein that inhibits JAK kinases." Nature. 387・6636. 921-924 (1997)
• [文献書誌] Yokouchi,M.,et al: "Cloning and Characterization of APS,an adaptor molecule containing PH and SH2 domains that is tyrosine phosphorylated upon B-cell receptor stimulation." Oncogene. 15・1. 7-15 (1997)
• [文献書誌] Iwatsuki,K.,et al: "STST5 activation correlates with erythropoietin receptor-mediated erythroid differentiation of an erythroleukemia cell line." J.Biol.Chem.272・13. 8149-8152 (1997)
• [文献書誌] Matsumoto,A.,et al: "CIS,a cytokine inducible SH2 protein,is a target of the JAK-STAT5 pathway and modulates STAT5 activation." Blood. 89・9. 3148-3154 (1997)
• [文献書誌] Masuhara,M.,et al: "Cloning and Characterization of Novel CIS Family Genes." Biochem.Biophys.Res.Comm.239・2. 439-446 (1997)
• [文献書誌] Misawa,H.,et al: "Cloning and Characterization of a novel class II Phosphoinositide 3-kinase containing C2 domein." Biochem.Biophys.Res.Comm.(in press). (1998)