がん浸潤におけるβカテニン-増殖因子受容体間結合とそのシグナル伝達機構の解明

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09470056
• 研究機関: 国立がんセンター
• 研究代表者: 落合 淳志 国立がんセンター, 研究所支所臨床腫瘍病理部, 部長 (60183034)
• 研究分担者: 金井 弥栄 国立がんセンター, 研究所病理部, 室長 (00260315) ; 中西 幸浩 国立がんセンター, 研究所病理部, 主任研究官 (10260316) ; 坂元 亨宇 国立がんセンター, 研究所病理部, 室長 (40221270)
• キーワード: βカテニン / 増殖因子受容体 / シグナル伝達 / 細胞接着分子 / がん浸潤 / チロシンリン酸化

研究概要

がん浸潤におけるβカテニン-増殖因子受容体間の結合とそのシグナル伝達機構を明らかにする目的で、βカテニンの増殖因子受容体との結合部位を明らかにしてきたが、今年度はβカテニンのc-erbB-2との結合部位が増殖因子刺激によりシグナル伝達されチロシンリン酸化を受けることを明らかにするため、βカテニン結合部位のチロシン残基に対するモノクローナル抗体を作製し、細胞接着機能に結合部位のチロシンリン酸化がいかに関わるかを明らかにするとともに、実際のがん組織においてもβカテニンの増殖因子受容体結合部位のチロシンリン酸化が起こっているかを検討した。
1. βカテニンの12番目のアルマジロ反復配列のチロシン残基をリン酸化させたペプチドを抗原としてモノクローナル抗体の作製を試み、チロシンリン酸化βカテニンに反応するが非リン酸化βカテニンには反応しない抗体(4G7)を作製した。4G7抗体は増殖因子でリン酸化されたがん細胞のβカテニンならびにγカテニンに結合することを確認した。同抗体を用いた検討では、増殖因子の刺激によりβカテニンの結合部位はチロシンリン酸化され、増殖因子受容体c-erbB-2と離れる。一方、カドヘリン-βカテニン間の結合は保たれるが、βカテニン-αカテニン間の結合が解離することが明らかとなった。
2. 実際のヒトがん組織を用いて4G7抗体の反応性を検討したところ、がん細胞ががん包巣から解離する部位で本抗体が陽性となり、実際のヒトがん組織でも増殖因子受容体からの刺激によりがん細胞間の解離が起こっていることが示された。

研究成果

• [文献書誌] Kanai.Y.,Ochiai,A.,et al.: "DNA hypermethylation at the D17S5 locus is associated with gastric carcinogenesis." Cancer Letters. 122. 135-141 (1998)
• [文献書誌] Nakanishi Y.,Ochiai,A.,et al.: "Clinicopathological significance of small Lugol's Iodine Unstained areas in the mucosa surrounding resected esophageal cancer." Cancer. 82. 1454-1459 (1998)
• [文献書誌] Inomata,M.,Ochiai,A.,et al.: "Macroscopic features at the deepest site of tumor penetration predicting liver metastases of colorectal cancer." Jpn.J.Clin.Oncol.28. 123-128 (1998)
• [文献書誌] Akimoto,S.,Ochiai,A.,et al.: "Expression of Cadherin-catenin cell adhesion molecules,phosphorylated tyrosine residues and growth factor receptor-tyrosine kinases in gastric cancers." Jpn.J.Cancer Res.89. 829-836 (1998)
• [文献書誌] Yasui,N.,Ochiai,A.,et al.: "Tumor growth and metastasis of human colorectal cancer cell lines in SCID mice resemble clinical metastatic behaviors." Invesion and Metasatsis.17. 259-269 (1998)
• [文献書誌] Kurisu,Y.,Ochiai,A.,et al.: "Histlological and Immunohistochemical analvsis of early submucosal in vasive carcinoma of the colon and rectum." Pathol International. (in press). (1999)