クラスIIMHC拘束性Bリンパ球の生成及び活性化機構

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09470094
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 濱岡 利之 大阪大学, 医学部, 教授 (60028529)
• 研究分担者: 小野 史郎 大阪大学, 医学部, 助教授 (80127208)
• キーワード: Bリンパ球 / Ia分子 / 抗体産生 / ノックアウトマウス / トランスジェニックマウス

研究概要

我々はIa欠損マウスを用いた実験で、LPS(リポ多糖)等のPBA(po1yclonal B cell activator)による休止B細胞のIgM抗体産生細胞への多クローン性分化過程に、non-Ia分子と自己Ia分子とを介するIa拘束性B-B細胞間相互作用が先行し,その結果として活性化されたB細胞にPBAが作用して抗体産生細胞への分化が誘導されるという活性化経路が介在している事を示した。本年度は、抗phosphorylcholine抗体を産生するミエローマS107の再構成済みの重鎖遺伝子をIg locusにノックインし、また軽鎖遺伝子をtransgeneとして導入することにより、殆ど全てのB細胞が導入した可変遺伝子の組合わせのみを発現し且つ正常にクラススイッチが起こるIg transgenicマウスを作製し、表面免疫グロブリン(sIg)がIa拘束性を担う可能性を検討した。また、H-2M欠損マウス(Ia分子の発現量は正常B細胞とほぼ同程度であるが、殆どのIa分子はinvariant鎖由来ペプチドCLIPで飽和)を用いてIaと会合する種々の自己成分由来ペプチドがIa拘束性B細胞活性化に関与する可能性についても検討した。
結果として、Ig transgenicマウスの牌臓B細胞をLPSと共に培養した場合、対照正常マウスB細胞と比べて極めて低いレベルのIgM産生しか誘導されなかった。しかし、LPS刺激による増殖反応は正常に惹起される事から、低IgM産生応答はLPS応答性での欠損に起因するのではない事が確かめられた。一方、Ia拘束性B細胞活性化が介在しないIL-5刺激によるlgM産生応答では正常マウスと同程度の応答性を示したので、Ig transgenicマウスに抗体産生での一般的な欠損が存在するのではない事も確認された。以上の如く、単一の特異性のB細胞だけを発現するマウスは、Ia拘束性B細胞活性化での欠損を有する事が判明した。更に、H-2M欠損マウスB細胞は、LPS刺激によるIgM抗体産生に於て、正常B細胞と同程度の応答性を示した。また、その反応は抗Ia抗体の培養系への添加により阻害された。以上、h拘束性B-B細胞間相互作用は、会合するペプチド特異性とは無関係に自己h分子そのものに親和性を有する表面迫分子により担われている可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] R.Wijesuriya et.al.: "B cell-mediated down-regulation of IFN-γ and IL-12 production induced during anti-tumor immune responses in the tumor-bearing state." Int.Immunology. 10. 1057-1065 (1998)
• [文献書誌] H.-J.Ahn et.al.: "Requirement for distinct Janus kinases and STAT proteins in T cell proliferation versus IFN-γ production following IL-12 stimulation." J.Immunol.161. 5893-5900 (1998)
• [文献書誌] A.Kosugi et al.: "Physical and functional association between thymic shared antigen-1/stem cell antigen 2 and the T cell receptor complex." J.Biol.Chem.273. 12301-12306 (1998)
• [文献書誌] C.-S.Park et.al.: "Differential involvement of a Fas-CPP32-like protease pathway in apoptosis of TCR/CD9-costimulated,naive T cells and TCR-restimulated,activated T cells." J.Immunol.160. 5790-5796 (1998)
• [文献書誌] M.Tomura et al.: "A critical role for interleukin-18 in the proliferation and activation of NK1.1+CD3- cells." J.Immunol.160. 4738-4746 (1998)
• [文献書誌] Y.Yashiro et al.: "A fundamental difference in the capacity to induce proliferation of naive T cells between CD28 and other costimulatory molecules." Eur.J.Immunol.28. 926-935 (1998)