胸腺細胞の選択的分化の分子機構-DP細胞特異的分子の解析を中心にして-

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09470098
• 研究機関: 東海大学
• 研究代表者: 垣生 園子 東海大学, 医学部, 教授 (30051618)
• 研究分担者: 伊藤 守 実験動物中央研究所, 免疫研究室, 室長 (00176364) ; 佐藤 健人 東海大学, 医学部, 助手 (50235363) ; 安藤 潔 東海大学, 医学部, 講師 (70176014)
• キーワード: 胸腺細胞 / TCR / シスエレメント / germ line転写

研究概要

胸腺内でのT細胞への分化機構を解明するために、(1)TCR遺伝子再構成/発現を分化段階特異的に制御/誘導する因子と、(2)TCRを介したシグナルのoutputとして活性化された分子を明らかにすることを本研究の目的とし、本年度は以下の成果を得た。
1)TCR-a遺伝子の発現を分化段階特異的に制御するcis-elementを見出した(Eur.J.Jmmunol.1998 in press)。この領域は、Ja49の開始点上流約900bp内に含まれ、CD25-DN細胞からpre-DPstageであるCDIT8SP細胞への特定な分化ステージのみでpromoter活性を示し、それに対応してこのステージの胸腺細胞はJa49のgermline転写を示した。TCR遺伝子のgerm line転写は、当該遺伝子の再構成に先行するDNA変化であることから、このcis-elementに結合する転写因子がTCR-a遺伝子の再構成を分化段階特異的に規定する因子と推測された。来年度にはこの転写因子同定をすすめる予定である。
2)DP細胞がSP細胞に分化するためにはTCRを介したシグナルが必要であるが、CD4SP細胞とCD8SP細胞への分化に必要なシグナルは必ずしも相称的に同じでないことを見出した(論文投稿中)。DP細胞はTCRシグナルによりpositive selectionを受ける際、成熟T細胞と同様PTKが活性化され、その結果細胞質内蛋白質基質がリン酸化される。しかし、その中でZAP-70のチロシンリン酸化はCD8+SPに分化する場合の方が強いことを、TCR遺伝子導入マウスを用いて明らかにした。
3)選択的分化を受けないDP細胞の死滅に関与する分子として、膜型脱リン酸化酵素であるCD45が関与することを示した(論文投稿中)。TCRを介したシグナルが欠如したDP細胞では、細胞増殖に関与するMAP kinase活性及び細胞の生存保持に関与するJNK活性が共に低下したが、それらはCD45欠如マウスにより回復し、細胞死も減少した。

研究成果

• [文献書誌] K.Hozumi,Y.Tanaka,T.Sato,A.Wilson & S.Habu: "Evidence of stage-specific element for germ-line transcription of the T cell receptor α gene located upstream of Jα49 locus" Eur.J.Immunol.(in press). (1998)
• [文献書誌] M.Watanabe,Y.Ueno,T.Yajima,S.Habu,J.Hata,T.Hibi et al: "Interleukin-7 transgenic mice developchronic colitis with decreased interleukin-7 protein accumulation in the colonic mucosa" J.Exp.Med.187・3. 389-402 (1998)
• [文献書誌] M.Timon,G.Elgar,S.Habu,K.Okumura & P.C.L.Beverley: "Molecular cloning of major histocompatibility complex class I cDNAs from the pufferfish fugu rubripes" Immunogenetics. (in press). (1998)
• [文献書誌] Y.Ohmi,A.Ohta,Y.Sasakura,S.Habu,T.Nishimura,et al: "The role of phorbol ester-sensitive protein kinase C isoforms in lymphokine-activated killer cell-mediated cytotoxicity:Dissociation between perforin-dependen and fas-dependent cytotoxicity" Biochemical and biophysical Research Communications. 235・3. 461-464 (1997)
• [文献書誌] A.Ohta,T.Sato,H.Tashiro,S.Habu & T.Nishimura: "Manipulation of Th1/Th2 balance in vivo by adoptive transfer of antigen-specific Th1 or Th2 cells" J.Immunological Methods. 209. 85-92 (1997)
• [文献書誌] K.Haneda,K.Sano,T.Sato,S.Habu & K.Shirato: "TGF-β induced by oral tolerance ameliorates experimental tracheal eosinophilia" J.Immunol.159・9. 4485-4490 (1997)
• [文献書誌] H.Kurooka,K.Kato,J.Ikeda,S.Habu,T.Honjo,et al: "Cloning and characterization of the nucleoredoxin gene that encodes a novel unclear protein related to thioredoxin" Genomics. 39. 331-339 (1997)
• [文献書誌] T.Nishimura,K.Santa,T.Sato,K.Hozumi,S.Habu et al: "Involvement of IL-4 prodecing Vβ8.2^+CD4^+CD62L^-CD45RB^- T cells in Non-MHC gene-controlled predisposition toward skewing into T helper type-^2immunity in BALB/c mice^1" J.Immunol.158・12. 5698-5705 (1997)