胸腺細胞の選択的分化の分子機構-DP細胞特異的分子の解析を中心にして-

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09470098
• 研究機関: 東海大学
• 研究代表者: 垣生 園子 東海大学, 医学部, 教授 (30051618)
• 研究分担者: 伊藤 守 実験動物中央研究所, 免疫研究所, 室長 (00176364) ; 佐藤 健人 東海大学, 医学部, 助手 (50235363) ; 安藤 潔 東海大学, 医学部, 講師 (70176014)
• キーワード: T細胞レセプター / 細胞増殖抑制 / 正の選択的分化 / 遺伝子再構成 / MAPK / 胸腺細胞

研究概要

胸腺内T細胞分化過程では、TCRから正のシグナルを受けたCD4+8+(DP)細胞のみが選択的に生存を保持して次の段階に分化する。TCRからのシグナルは同時にTCR-α鎖遺伝子のさらなる再構成を抑制することによりDP細胞の死を阻止すると考えられている。本研究では、正の選択はDP細胞を死から回避するプロセスと捉え、細胞死と増殖に関与する分子およびTCR-α遺伝子の再構成・発現を制御する因子に焦点を当てて、正の選択機構を検索した。その結果次の成果を得た。1)昨年は、CD45がDP細胞の増殖に抑制的に作用することを証明したが、本年は、MAPKファミリーの1つであるJNKがDP細胞の選択的分化に細胞生存を保持することにより関与することを明らかにした。この証明の過程で、未熟T細胞にレトロウイルス感染系により目的とする遺伝子をin vitroで導入する系を開発した。3)昨年、TCR-α鎖遺伝子のうち、Jα49の上流域に分化ステージ特異的にJαセグメントを制御する新たなシスエレメントを発見したので、本年はその部位を欠如したノックアウトマウスを作製し、当該シスエレメントの生埋的機能を調べたことろ、Jα49-45セグメントの遺伝子再構成とgermline転写が認められなかった。このことは、TCR-α鎖遺伝子にはエンハンサーの多に分化ステージ特異的なシスエレメントが必要であることを示している。現在、エンハンサーの分化段階特異性に関する機能を検討するために、TCR-β鎖のエンハンサーをα鎖のそれと置換したミュータントマウスを作製し、解析中である。

研究成果

• [文献書誌] Katsuto Hozumi: "Stage specific element for germ-line transcription of the TCR receptor α gene" 10th International Congress of Immunology. 173-176 (1998)
• [文献書誌] Takehito Sato: "β-selection of immature thymocytes is less dependent on CD45 tyrosinephosphatase." Immunol.Lett.64. 133-138 (1998)
• [文献書誌] Takehito Sato: "CD45 can act as a negative fegulator for the transition from early to late CD4^+CD8^+ thymocytes" Int.Immunol.11. 89-97 (1999)
• [文献書誌] Yoshie Kametani: "EX vivo evidence for asymmetric tyrosine phosphorylation of ZAP-70 on double-positive thymocytes in the positive seleciton process" Int.Immunol.10. 1203-1210 (1998)
• [文献書誌] Katsuto Hozumi: "Evidence of stage-specific element for germ-line transcription of the T cell receptor α gene located upstream of Jα49 locus" Eur.J.Immunol.28. 1368-1378 (1998)
• [文献書誌] Mamoru Watanabe: "Interleukin-7 transgenic mice develop chronic colitis with decreased interleukin-7 protein accumulation in the colonic mucosa" J.Exp.Med.187. 389-402 (1998)
• [文献書誌] Marcos Timon: "Molecular cloning of major histocommpatibility complex class I cDNAs from the oufferfish Fugu rubripes." Immunogenetics. 47. 170-173 (1998)
• [文献書誌] Kan Shida: "Lactobacillus casei inhibits antigen-induced IgE secretion through regulation of cytokine production in murine splenocyte cultures." Int.Arch.Allergy Immunol.115. 278-287 (1998)