BCRシグナル伝達に於けるチロシンキナーゼSykの標的分子群の解析

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09470099
• 研究機関: 関西医科大学
• 研究代表者: 黒崎 知博 関西医科大学, 医学部, 教授 (50178125)
• 研究分担者: 安達 貴弘 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 講師 (50222625)
• キーワード: BCRシグナル / Syk / Vav / チロシン燐酸化 / NF-AT活性化

研究概要

BCR(B細胞抗原受容体)はB細胞上に発現しており、BCRを介して細胞内にシグナル伝達されることが、B細胞の活性化・分化に泌須である.BCR刺激により最初に誘起される生化学反応は蛋白質のチロシン燐酸化であり、BCR刺激により活性化されるPTKの内、Sykが重要な役割を担っていることが欠損B細胞、knock-out mouseの解析より明らかにされていた。従って、私達はSykのターゲット蛋白質の単離とその蛋白質のBCRシグナルにおける機能解析を目的として研究を行っている。
Syk/Zap-70familyPTKにより、Vavがチロシン燐酸化されることを明らかにした。即ちVavはSykのターゲット蛋白質の一つと考えられる。VavはSH2domainを有しており、このdomainがSykのinterdomainBに存在する燐酸化チロシン残基にリクルートされた後、燐酸化される。このinterdomainBのチロシン残基をPheに変換した変異Sykでは、BCR依存性のNF-AT活性化の阻害が見られることより、VavがBCRシグナルに於いて重要な機能を担っていることが示唆される。又wild-typeBのチロシン燐酸化され、Syk欠損細胞でチロシン燐酸化が認められない85KDa蛋白質を単離して、そのアミノ酸部分一次構造を決定した。この蛋白質もSykのターゲット蛋白質と考えられ、現在そのクローニングをすすめている。
これまでの研究成果により、Vav,85KDa蛋白質はSykのターゲット蛋白質と想定され、これらターゲット蛋白質の機能検定・活性化機構解明のため、欠損細胞を樹立する必要がある。

研究成果

• [文献書誌] El-Hillal,O., et al.: "Syk kinase activation by a src kinase-initiated activation loop phosphorylation chain reaction." Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A. 94. 1919-1924 (1997)
• [文献書誌] Wu,J., et al.: "The Vav binding site in ZAP-70 is critical tor antigen receptor-madiated signal transduction." J.Exp.Med.185. 1877-1882 (1997)
• [文献書誌] Qin,S., et al.: "Distinctive functions of Syk and Lyn in mediating osmotic stress-and ultraviolet C irradiation-induced apoptosis in chicken B cells." J,Biol.Chem.272. 17994-17999 (1997)
• [文献書誌] Li,H-L., et al.: "Syk is required for BCR-mediated activation of p90Rsk,but not p70S6k,via a Mitogen-activated protein kinase-independent pathway in B cells." J,Biol.Chem.272. 18200-18208 (1997)
• [文献書誌] Kurosaki,T.: "Molecular mechanisms in B cell antigen receptor signaling." Curr.Opin.Immunol.9. 309-318 (1997)
• [文献書誌] Kurosaki,T.: "Molecular dissection of cell antigen receptor signaling." Int.J.Mol.Med.(in press).