研究概要 |
拮抗型GH異常症例の解析 Arg77Cysのへテロ接合体の異常成長ホルモン(GH)例で発端者の父にも本変異を認めたが父方祖母には認めなかった。したがって父のphenotypeやGH mRNA,蛋白が正常であった理由はuniparental disomyでは説明できず、somatic mosaicismの可能性が高いと考えられた。また本例では高用量GHでは血中IGF-I反応性を認めた。 GH受容体(GHR)異常症例の解析 1.GH結合蛋白(GHBP)高値のGH不応症兄妹例で、GHR遺伝子intron 9のdonor siteのへテロ接合体の変異によるsplice異常でexon 9のskipとframe shiftが生じ、GHR-277が発現する症例を報告した。そこでこの変異GHRをCOS7細胞に一過性に強制発現させ野性型と比較したところ、変異型でGH結合量の増加、internalizationの障害、培養液中のGHBP濃度の高値が確認された。さらに変異GHRを野性型とCHO細胞に共発現させ、GHのsignal伝達分子の一つstat-5のリン酸化を指標にdominant negativeに作用することを確認した。2.高度低身長の男児例で家族性やGH分泌不全はなかったが,血中GHBPやや低値で、血中IGF-1も基礎値、GHに対する反応値ともに低値であった。GHR異常が疑われ、遺伝子解析の結果、細胞質ドメインのC422Fのへテロ接合体の変異を認めた。そこでこの変異GHRをCOS7細胞に一過性に強制発現させ野性型と比較したが、培養液中のGHBP濃度、intemalizationに差はなく、さらに変異GHRを野性型とCHO細胞に共発現させ、stat-5のリン酸化、さらにラクトフェリンの転写活性をLHRE-luciferaseで比較したが有意の影響を認めず、病因と無関係のpolymorphismと結論した。
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