前立腺特異抗原(PSA)を利用した前立腺癌ターゲティング遺伝子療法

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09470352
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 村井 勝 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90101956)
• 研究分担者: 中島 淳 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (10167546) ; 朝倉 博孝 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (50175840) ; 小山 政史 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (70276351) ; 大東 貴志 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (80185371)
• キーワード: 前立腺癌 / PSA / 遺伝子治療 / プロモーター

研究概要

昨年までに前立腺癌ターゲッティング遺伝子治療として、1.PSAプロモーターをcytosine deaminase(CD)遺伝子の上流にクローニングしたアデノウイルスベクターによる自殺遺伝子療法、2.腫瘍細胞に特異的増殖性を示す変異ヘルペスウィルス(HSV)を用いた腫瘍特異的療法について検討を加えてきた。1のアデノウイルスではPSA陽性前立腺癌細胞にのみCD遺伝子の発現が認められたが、予想されたような抗腫瘍効果は軽度であった。2.についてはin vitro、in vivoにおいて強い抗腫瘍効果が認められた。特にin vivoにおいては腫瘍特異的にウイルスの複製を認めた。
今年度は前立腺癌に対する特異性を持たせるためにまず、DNA plasmid pHSVdeltatkLに、PSA promotorとそれによりdriveするICP4(ヘルペスウイルスの複製を第一段にregulateする遺伝子)のtranscription unitを組み込んだ。ICP4 deletion mutant HSV(d120)よりviral DNAを抽出し、これらをcomplimenting cellにco-transfectionし、homologous recombinationを誘導してPSA promoter-ICP4 unitを組み込んだ組換えHSVを構築した。しかしながら、PSA発現前立腺癌細胞LnCapにおいてルシフェラーゼ法によりPSApromotorの転写活性を観察したところ十分なプロモーター活性が得られなかった。アデノウイルスの場合と考え合わせ、PSApromotorに変えて、PSMpromotorを使用したところより強い活性が得られた。現在前立腺癌細胞における特異的殺細胞効果をin vitroおよびin vivoで検討している。

研究成果

• [文献書誌] Oyama,M.,Murai,M., et al.: "Intra-vesical and intravenous therapy of human bladder cancer by the herpes vector G207."Human Gene Therapy. 11. 1683-1893 (2000)
• [文献書誌] Oyama,M.,Murai,M., et al.: "Oncolytic viral therapy for human prostate cancer by conditionally replicating herpes simplex virus vector G207."Japanese Journal of Cancer Research. 91. 1339-1344 (2000)
• [文献書誌] Nakashima,J.,Murai,M., et al.: "Serum interleukin 6 as a prognostic factor in patients with prostate cancer."Clinical Cancer Research. 6. 2702-2706 (2000)
• [文献書誌] Nakashima,J.,Murai,M., et al.: "Prognosis value of alkaline phosphatase flare in patients with metastatic prostate cancer treated with endocrine therapy."Urology. 56. 843-847 (2000)
• [文献書誌] Oyama,M.,Murai,M., et al.: "Application of conditionally replicating herpes vector for gene therapy treatment of urologic neoplasms."Molecular Urology. 4. 83-87 (2000)