子宮体癌の分子構造の解明と遺伝子診断の開発

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09470362
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 和氣 徳夫 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (50158606)
• 研究分担者: 西田 純一 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (40264113) ; 加藤 聖子 九州大学, 生体防御医学研究所, 講師 (10253527) ; 加藤 秀則 九州大学, 生体防御医学研究所, 講師 (60214392) ; 松田 貴雄 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (10304825)
• キーワード: endometrial cancer / tumor supppressor gene on 1q / cell senescence / Ras / ER / DPC4 / DCC / cyclin G

研究概要

1) 1番染色体の子宮体癌抑制遺伝子の単離:60例の子宮体癌について1q上のLOH解析を行った結果、抑制遺伝子は1q42領域に存在すると判明した。1q42領域をカバーするBACコンティグを得、子宮体癌細胞へトランスフェクトした結果、特定のBACクローンに子宮体癌抑制機能があることが判明した。現在BACクローンから候補遺伝子cDNAを単離している。
2) 子宮体癌発生におけるエストロゲンリセプター(ER)の関与:NIH3T3細胞へ変異型K-Rasを導入するとERの機能的活性化を介して細胞はトランスフォームする。このため、ERのdominant negative変異体を変異型K-Ras発現細胞へ遺伝子導入した。その結果、細胞は大型化、多核化、平坦化し、βーGal染色陽性細胞の出現が誘導された。これらの形質の発現はER変異体により細胞老化が誘導されたためと解釈された。細胞老化の誘導はp53-p21発現の増大を伴っていた。このため、ER-p53経路はRas下流で細胞老化を回避していると示唆された。
3) 子宮体癌で認められる18qLOHは、DCC及びDPC4遺伝子両方の不活化に関与していた。DP4遺伝子プロモーター変異を子宮体癌で観察した。このため、DPC4遺伝子は18q欠失及び残存アリルプロモータ変異により不活化され、子宮体癌の発生に関与すると示唆された。DCC遺伝子導入により子宮体癌細胞の造腫瘍性は失われ、アポトーシスによる細胞死が誘導された。子宮体癌細胞におけるDCC遺伝子不活化は癌細胞のアポトーシス回避に機能することが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Murakami A et al: "Photodynamic antisense regulation (PDAR) of human cervical carcinoma cell growth using psoralen-conjugated oligo (nucleoside phosphorothioate)."European Journal of Pharmaceutical Science. in press.
• [文献書誌] Ueoka Y et al: "HGF and Ovarian carcinoma cell motility and invasion :"British Journal of Cancer. in press.
• [文献書誌] Hachiya T et al: "WAF1 Genotype and Endometrial Cancer Susceptibility"Gynecologic Oncology. 72. 187-192 (1999)
• [文献書誌] Zhou Y et al: "Involvement of mutations in the DPC4 promoter in endometrila carcinoma development."Molecular Carcinogenesis. 25. 64-72 (1999)
• [文献書誌] Kato K et al: "Relevance of ER to the development of endometrial hyperplasia and adenocarcinoma."Breast Cancer. 6. 312-319 (1999)