1998 年度実績報告書

初期胚発育および着床における分子生物学的調節機構-着床不全病態の解明-

研究課題

研究課題/領域番号	09470365
研究機関	慶応義塾大学
研究代表者	吉村泰典慶應義塾大学, 医学部, 教授 (10129736)
研究分担者	久慈直昭慶應義塾大学, 医学部, 助手 (80169987) 宮崎豊彦慶應義塾大学, 医学部, 講師 (20174162) 末岡浩慶應義塾大学, 医学部, 講師 (90162833)
キーワード	子宮内膜 / 脱落膜 / β_1インテグリン / hatching / attachment / outgrowth
研究概要	インテグリンを介したシグナル伝達機構 1) 培養子宮内膜間質細胞や脱落膜細胞においてインテグリンを介したシグナル伝達に関与する pp125^<FAK>の局在を抗FAK抗体、抗リン酸化チロシン抗体、抗タリン抗体、抗β_1インテグリン抗体を用いて免疫蛍光2重染色し、細胞表面における局在を共焦点レーザー顕微鏡を用いて解析した。その結果、細胞接着斑にFAK、β_1インテグリンおよびタリンが蛍光染色された。FAKの発現は、細胞膜周囲に多くみられ、チロシンリン酸化を受けていた。 2) チロシンリン酸化阻害剤であるハービマイシンを用いてBlastocyst Attachmen-Spreading Assay(BASA)を行い、着床現象、特にトロホブラストのoutgrowthに及ぼすチロシンリン酸化阻害剤の作用を画像解析した。ハービマイシンの添加は、トロホブラストのoutgrowthの面積を用量反応性に抑制した。 3) β_1インテグリンのbinding siteのアミノ酸配列(β_1[140-164])より種々のペプチドDYPIDLYYLMDLSYSMKDDLENVKS(DD)およびDYPIDLYYLMDLSYSMKAALENVKS(AA)を合成しHPLC精製を行った後、子宮内膜間質細胞や脱落膜細胞に添加し、fibronectinあるいはlamininなどのECMをコートしたdishへの細胞接着能を検討した。脱落膜細胞へのDDおよびAAの添加はマウス胞胚のhatchingやattachmentに影響を与えなかった。しかしながら、DDの添加はトロホブラストのoutgrowthした面積を用量反応性に抑制した。本年度の研究により、FAKは子宮内膜間質細胞や脱落膜の接着斑に存在し、チロシンリン酸化を受け、トロホブラストのoutgrowthに関与していると考えられた。またβ_1インテグリンのアミノ酸配列における[140-164]は、RGD認識部位であることが明らかとなった。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Yoshimura Y et al.: "Role of β_1 integrins in human endometrium and decidua during implantation." Horm Res. 50(suppl 2). 46-55 (1998)
[文献書誌] Yoshimura Y: "Insulin-like growth factors and ovarian physiology." J Obstet Gynaecol Res. 24. 305-323 (1998)
[文献書誌] Maruyama T,Yoshimura Y et al.: "Thioredoxin expression in the human endometrium during the menstrual cycle." Mol Hum Reprod. 3. 989-993 (1997)
[文献書誌] Sueoka K,Yoshimura Y et al.: "Falloposcopic tuboplasty for bilateral tubal occlusion. A novel infertility treatment as an alternative for in-vitro fertilization?" Hum Reprod. 13. 71-74 (1998)
[文献書誌] Tei C,Yoshimura Y et al.: "Effect of danazol on the pregnancy rate in patients with unsuccessful in vitro fertilization-embryo transfer." J Reprod Med. 43. 541-546 (1998)
[文献書誌] Shiokawa S,Yoshimura Y et al.: "Functional role of focal adhesion kinase in the process of implantation." Mol Hum Reprod. 9. 907-914 (1998)
[文献書誌] 吉村泰典、星和彦、武谷雄二編: "不妊の基礎-病態の解明をめざして-" MEDICAL VIEW, 193 (1998)
[文献書誌] 星和彦、吉村泰典、武谷雄二編: "不妊の臨床-診断・治療の向上をめざして-" MEDICAL VIEW, 210 (1998)

1998 年度 実績報告書

初期胚発育および着床における分子生物学的調節機構-着床不全病態の解明-

研究代表者

吉村 泰典 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (10129736)

研究成果

[文献書誌] Yoshimura Y et al.: "Role of β_1 integrins in human endometrium and decidua during implantation." Horm Res. 50(suppl 2). 46-55 (1998)

[文献書誌] Yoshimura Y: "Insulin-like growth factors and ovarian physiology." J Obstet Gynaecol Res. 24. 305-323 (1998)

[文献書誌] Maruyama T,Yoshimura Y et al.: "Thioredoxin expression in the human endometrium during the menstrual cycle." Mol Hum Reprod. 3. 989-993 (1997)

[文献書誌] Sueoka K,Yoshimura Y et al.: "Falloposcopic tuboplasty for bilateral tubal occlusion. A novel infertility treatment as an alternative for in-vitro fertilization?" Hum Reprod. 13. 71-74 (1998)

[文献書誌] Tei C,Yoshimura Y et al.: "Effect of danazol on the pregnancy rate in patients with unsuccessful in vitro fertilization-embryo transfer." J Reprod Med. 43. 541-546 (1998)

[文献書誌] Shiokawa S,Yoshimura Y et al.: "Functional role of focal adhesion kinase in the process of implantation." Mol Hum Reprod. 9. 907-914 (1998)

[文献書誌] 吉村泰典、星和彦、武谷雄二編: "不妊の基礎-病態の解明をめざして-" MEDICAL VIEW, 193 (1998)

[文献書誌] 星和彦、吉村泰典、武谷雄二編: "不妊の臨床-診断・治療の向上をめざして-" MEDICAL VIEW, 210 (1998)

1998 年度実績報告書

吉村泰典慶應義塾大学, 医学部, 教授 (10129736)