| 研究概要 |
歯の形成過程で発現するTGF-βスーパーファミリーの遺伝子カスケードを検索するために以下の実験を行った。
材料および方法
胎生期9から,生後7日までのDDYマウスの臼歯と切歯を用いてパラフィン切片を作製した。
In situ hybridization(ISH),
probeの作成に使用したcDNAは
リガンド TGF-β1,BMP-2,-4,GDF,
レセプター BMPとTGF-βレセプターtype I,-II,
細胞外マトリックス amelogenin,type I collagenである。
Dig-UTP存在下でRNA probeを作製し反応した。
免疫組織化学ではprobeに対応した抗体で行った。
結果
a.リガンド
TGF-β1の遺伝子発現と局在は前エナメル芽細胞,前象牙芽細胞に強い反応が観察された。分泌期エナメル芽細胞と象牙芽細胞では反応は弱かったが移行期エナメル芽細胞には最も強い反応が観察された。BMPでは胎生期臼歯の間葉細胞に現れ次に前エナメル芽細胞に観察された。GDG-5は前エナメル芽細胞および成熟期後期のエナメル芽細胞に極めて強い発現を示した。
b.receptor
分泌期まではリガンドと同様の局在を示した。成熟期においてはruffled-ended ameloblastとsmooth-ended ameloblastの移行する部位のエナメル芽細胞に観察された。
c.細胞外マトリックス
amelogeninはエナメル芽細胞,collagenは象牙芽細胞に見られた。
TGF-βスーパーファミリーautocrineあるいはparacrineとして作用し,歯の形成過程においてエナメル芽細胞や象牙芽細胞の分化をや細胞外マトリックスの合成を制御しているものと考えられた。
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