1997 年度実績報告書

活性酸素によるDNA障害防止の分子機構

研究課題

研究課題/領域番号	09480125
研究機関	九州大学
研究代表者	續輝久九州大学, 医学部, 教授 (40155429)
研究分担者	早川浩九州大学, 医学部, 助手 (70150422)
キーワード	活性酸素 / 酸化ストレス / 突然変異 / 発がん / 8-oxo-dGTP / 8-オキソグアニン / DNA修復 / ミューテーター
研究概要	標的遺伝子組換えにより樹立したMTH1遺伝子(8-oxo-dGTPase)の欠損細胞・欠損マウス個体でのDNA損傷・遺伝子の変異さらに発がんを解析することで、直接実際に自然界で起こっている環境並びに生体内での酸化ストレスに起因するDNA損傷のタイプ及びその程度、DNA障害防止系の効率及び生物学的意義を解明する。また活性酸素によるDNA障害とりわけDNA合成の基質である「ヌクレオチド・プールの浄化」について、生体内では様々な過程で8-oxo-dGTPの産生を抑制するなど第2・第3の防御機構が存在する可能性も考えられる。樹立したMTH1遺伝子の欠損マウスを出発材料として、8-oxo-dGTPase以外の酵素系についても系統的に検索することで、活性酸素によるDNA障害の防止機構を体系的に理解することを目的としている。 (1)MTH1遺伝子欠損マウスについて、野生型マウスをコントロールとして酵素の活性、および自然発癌のレベルを検討した。 (2)ES細胞レベルにおいて、樹立した対立遺伝子の両方に変異を導入した細胞(ダブル・ノックアウト細胞)株を使用し、野生型細胞株と比較して、hprt遺伝子座での突然変異率(6-チオグアニン耐性コロニーの出現頻度)の解析を行なった。 (3)樹立したMTH1遺伝子欠損マウスの肝臓からエクストラクトを調製し、その中に含まれる8-oxo-dGTPを排除する酵素活性につき系統的に検索している。 (4)MTH1遺伝子欠損マウスを近交系のC57BL6、C3H/He、DBA/2、Balb/c系統と戻し交配を行なうことで遺伝的背景を異にするマウス系統の樹立を開始した。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Tsuzuki,T.: "Embryonic stem cell gene targeting using bacteriophage λ vectors generated by phage-plasmid recombination." Nucleic Acids Res.(in press). (1998)
[文献書誌] Taddei,F.: "Counteraction by MutT protein of transcriptional errors caused by oxidative damage." Science. 278. 128-130 (1997)
[文献書誌] Iwakuma,T.: "High incidence of nitrosamine-induced tumorigenesis in mice lacking DNA repair methyltransferase." Carcinogenesis. 18・8. 1631-1635 (1997)
[文献書誌] Sakumi,K.: "Methylnitrosourea-induced tumorigenesis in MGMT gene knockout mice." Cancer Res.57. 2415-2418 (1997)
[文献書誌] Tominaga,Y.: "Alkylation-induced apoptosis of embryonic stem cells in which the gene for DNA repair methyltransferase had been disrupted by gene targeting." Carcinogenesis. 18・5. 889-896 (1997)
[文献書誌] Cai,J.-P.: "Significance of the conserved amino acid sequence for human MTH1 protein with antimutator activity." Nucleic Acids Res.25・6. 1170-1176 (1997)
[文献書誌] Igarashi,H.: "Organization and expression of the mouse MTH1 gene for preventing transversion mutation." J.Biol.Chem.272・6. 3766-3772 (1997)

1997 年度 実績報告書

活性酸素によるDNA障害防止の分子機構

研究代表者

續 輝久 九州大学, 医学部, 教授 (40155429)

研究成果

[文献書誌] Tsuzuki,T.: "Embryonic stem cell gene targeting using bacteriophage λ vectors generated by phage-plasmid recombination." Nucleic Acids Res.(in press). (1998)

[文献書誌] Taddei,F.: "Counteraction by MutT protein of transcriptional errors caused by oxidative damage." Science. 278. 128-130 (1997)

[文献書誌] Iwakuma,T.: "High incidence of nitrosamine-induced tumorigenesis in mice lacking DNA repair methyltransferase." Carcinogenesis. 18・8. 1631-1635 (1997)

[文献書誌] Sakumi,K.: "Methylnitrosourea-induced tumorigenesis in MGMT gene knockout mice." Cancer Res.57. 2415-2418 (1997)

[文献書誌] Tominaga,Y.: "Alkylation-induced apoptosis of embryonic stem cells in which the gene for DNA repair methyltransferase had been disrupted by gene targeting." Carcinogenesis. 18・5. 889-896 (1997)

[文献書誌] Cai,J.-P.: "Significance of the conserved amino acid sequence for human MTH1 protein with antimutator activity." Nucleic Acids Res.25・6. 1170-1176 (1997)

[文献書誌] Igarashi,H.: "Organization and expression of the mouse MTH1 gene for preventing transversion mutation." J.Biol.Chem.272・6. 3766-3772 (1997)

1997 年度実績報告書

續輝久九州大学, 医学部, 教授 (40155429)