1997 年度実績報告書

低分子阻害剤を利用したリン脂質加水分解酵素作用機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号	09480145
研究機関	関西学院大学
研究代表者	勝村成雄関西学院大学, 理学部, 教授 (70047364)
研究分担者	池田潔大阪薬科大学, 薬学部, 教授 (50001053)
キーワード	ホスホリパーゼA_2阻害剤 / 3-(E)-メトキシカルボニルトリエナ-ル / 阻害機構の解明 / リジンの選択的修飾 / ジヒドロピリジンの形成 / スフィンゴエミリナーゼ基質 / スフィンゴシンの立体選択的合成
研究概要	グリセロリン脂質の2位のエステル結合を位置特異的に加水分解する酵素であるホスホリパーゼA_2(PLA_2)の新しい阻害剤として、私たちは既に、3-(E)-メトキシカルボニルトリエナ-ル(1)を開発している。本年度は1の立体選択的合成法を、アセチレンに対する位置選択的ヒドロメタル化を実現することによって確立した。また、様々な類縁体を合成しそれらのPLA_2阻害活性を調べることにより、阻害活性を示すためには、1の3-(E)-メトキシカルボニルトリエナ-ル官能基の全てが必要であることを明らかにした。さらに、1とプロピルアミンとの反応の検討、及び、類縁体とPLA_2付加体のアミノ酸分析やMALDI-TOF-Massを検討することにより、1はPLA_2のリジン残基と非可逆的に反応し、ジヒドロピリジン誘導体を与えることによってPLA_2を不活性化させることを明らかにした。次いで、酵素消化や多重マススペクトルを用いて、1はウシPLA_2の界面認識部位を構成するLys-56を非可逆的に修飾することによりPLA_2を不活性化させるという阻害機構を明らかにした。一方私達は、PLA_2の触媒部位に作用し本来の基質と類似の結合様式を示すと推定させるオキサゾリジノンリン脂質をすでに開発しているが、今回、その類縁化合物を合成しそれらのPLA_2阻害活性を検討した結果、阻害作用を示すためにはオキサゾリジノン環を形成する全ての官能基が必要であることが明らかとなった。他方、スフィンゴエミリナーゼの基質となるスフィンゴリン脂質の、光学活性なグリシドールを原料とした効率よい立体選択的合成法を確立した。次いでこの方法によって、立体異性体や様々の類縁体を合成し、それらのスフィンゴミエリナーゼに対する加水分解のされ易さを検討することにより、基質となるためにはアミノアルコール部の立体化学が重要であることを明らかにした。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Tanaka,K.: "Synthesis of a New Phospholipase A_2 Inhibitor of an Aldehyde Terpenoid and its Possible Inhibitory Mechanism." Teterahedron Letters. 39. 1185-1188 (1998)
[文献書誌] Tomoo,K.: "X-Ray Crystal Structure Determination and Molecular Dynamics Simulation of Phospholipase A_2 Inhibited by Amide-type Substrate Analogues." Biochimimica et Biophysica Acta. 1340. 178-186 (1997)
[文献書誌] Murakami,M.: "An Efficient Synthesis of Short-chain Spingomyelin Analogs and their Susceptibility to Hydrolysis Catalyzed by Sphingomyelinase." Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 7. 1725-1728 (1997)
[文献書誌] Inoue,S.: "Specificity of two types of phospholipase A2 inhibitors from inhibitors from the plasma of venomous snakes." Biochemistry and Molecule Biology International. 41. 529-537 (1997)
[文献書誌] Ohkura,N.: "Purification and characterization of three distinct types of phospholopase A2 inhibitors from the blood plasma of the Chinese mamushi, Agkistrondon blomhoffii siniticus." Biochemical Journal. 325. 527-531 (1997)
[文献書誌] Inoue,S.: "Dopaminergic transmitter up-regulation of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and nerve growth factor (NGF) synthesis in mouse astrocytes in culture." Biochemical and Biophysical Research Communication. 238. 468-472 (1997)

1997 年度 実績報告書

低分子阻害剤を利用したリン脂質加水分解酵素作用機構の解明

研究代表者

勝村 成雄 関西学院大学, 理学部, 教授 (70047364)

研究成果

[文献書誌] Tanaka,K.: "Synthesis of a New Phospholipase A_2 Inhibitor of an Aldehyde Terpenoid and its Possible Inhibitory Mechanism." Teterahedron Letters. 39. 1185-1188 (1998)

[文献書誌] Tomoo,K.: "X-Ray Crystal Structure Determination and Molecular Dynamics Simulation of Phospholipase A_2 Inhibited by Amide-type Substrate Analogues." Biochimimica et Biophysica Acta. 1340. 178-186 (1997)

[文献書誌] Murakami,M.: "An Efficient Synthesis of Short-chain Spingomyelin Analogs and their Susceptibility to Hydrolysis Catalyzed by Sphingomyelinase." Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 7. 1725-1728 (1997)

[文献書誌] Inoue,S.: "Specificity of two types of phospholipase A2 inhibitors from inhibitors from the plasma of venomous snakes." Biochemistry and Molecule Biology International. 41. 529-537 (1997)

[文献書誌] Ohkura,N.: "Purification and characterization of three distinct types of phospholopase A2 inhibitors from the blood plasma of the Chinese mamushi, Agkistrondon blomhoffii siniticus." Biochemical Journal. 325. 527-531 (1997)

[文献書誌] Inoue,S.: "Dopaminergic transmitter up-regulation of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and nerve growth factor (NGF) synthesis in mouse astrocytes in culture." Biochemical and Biophysical Research Communication. 238. 468-472 (1997)

1997 年度実績報告書

勝村成雄関西学院大学, 理学部, 教授 (70047364)