1997 年度実績報告書

血液流動性維持機構の分子細胞生物学的研究-特にプロテインC凝固制御系における血管内皮細胞膜受容体の構造・機能相関の解析-

研究課題

研究課題/領域番号	09480149
研究機関	三重大学
研究代表者	鈴木宏治三重大学, 医学部, 教授 (70077808)
研究分担者	林辰弥三重大学, 医学部, 助手 (00242959) 武谷浩之三重大学, 医学部, 助手 (60222105) 井戸正流三重大学, 医学部, 講師 (90167263)
キーワード	プロテインC / プロテインS / トロンボモジュリン / プロテインC受容体 / プロテインS受容体 / トロンボモジュリン異常症 / プロテインC受容体異常症 / 血液流動性維持機構
研究概要	ヒトが生命活動を営む上で血液の流動性維持は不可欠であり、その破綻により生じる血栓塞栓症は心筋梗塞や脳梗塞をはじめとして、直ちに生命活動の停止に至る危険性をはらんだ重篤な疾患である。この血液流動性機構のうち、プロテインC(PC)凝固制御系は特に重要であり、この制御系における血漿因子のトロンビンとPCに対する内皮細胞膜上のトロンボモジュリン(TM)とPC受容体、および未だその存在が示唆されてはいるが実体が明らかでないプロテインS(PS)受容体の構造と機能の解明はPC凝固制御系の分子機構の解明に不可欠である。そこで本研究では、(1)PC受容体の機能発現に必要な構造の解析、(2)PC受容体およびTMの先天性異常症患者の検索と異常分子の構造・機能相関の解析、(3)PS受容体の単離とその遺伝子クローニング、およびその構造と機能の解析、(4)PC受容体とPS受容体の組織・細胞分布の解析、(5)PC受容体、PS受容体およびTMの細胞膜上における分子間相互作用の解析などについて分子細胞生物学的研究を行う。本年度は、(1)先ず、昨年cDNAクローニングされたPC受容体の構造・機能相関を解明するため、種々の部位特異的欠失PC受容体の組換え蛋白をCHO細胞に発現させる変異cDNAを組み込んだ発現ベクターを作成した。現在これらの発現力価を高める操作を行っている。次に、(2)PC受容体ならびにTMの構造と機能の関係を解明するため、肺梗塞や脳梗塞などの血栓症発症患者の白血球から遺伝子を単離し、PC受容体ならびにTMの遺伝子変異の有無を解析した。現在、約70例の遺伝子解析を終了したが、これまでのところ両遺伝子の異常者は認めなかった。今後、PS受容体の単離と遺伝子クローニング、その構造と機能の解析、PC受容体とPS受容体の組織・細胞分布の解析、PC受容体、PS受容体およびTMの細胞膜上における分子間相互作用を解析する。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Hayashi,T., Usui,T., Suzuki,K., et al.: "Regulation of the human protein C inhibitor gene expression in HepG2 cells:Role of Spl and AP2." Biochem.J.(in press). (1998)
[文献書誌] Nishioka,J., Ma,N., Suzuki,k., et al.: "Protein C inhibitor secreted from activated platelets efficiently inhibits activated protein C on phosphatidylethanolamine of platelet membrane and microvesicles." J.Biol.Chem.(in press). (1998)
[文献書誌] Usui,M., Hayashi,T., Suzuki,K., et al.: "Canine lipopolysaccharide-binding protein:cDNA cloning and its tissue distribution of canine model of extended hepatectomy." Biochim.Biophys.Acta. (in press). (1998)
[文献書誌] Deguchi,H., Takeya,H., Suzuki,K., et al.: "Dilazep,an adenosine potentiator, inhibits tissue factor expression in the endothelial cells stimulated with tumor necrosis factor-α,thrombin or phorbol 12-myristate 13-acetate." Blood. 90. 2345-2356 (1997)
[文献書誌] Takeya,H., Mori,T., Suzuki,K., et al.: "Anti-β2-glycoprotein I(β2GPI)monoclonal antibodies with lupus anticoagulant-like activity enhance the β2GPI bindong to phospholipids." J.Clin.Invest.99. 2260-2268 (1997)
[文献書誌] Deguchi,H., Takeya,H., Suzuki,K., et al.: "Kringle I domain of prothrombin interacts with factor Va during the assembly of the prothrombinase complex." Biochem.J.321. 729-735 (1997)
[文献書誌] 鈴木宏治: "Annual Review 血液 1998" 中外医学社(高久史麿他編), 245(10) (1998)
[文献書誌] 鈴木宏治: "DIC Ology" メジカルレビュー社(丸山征郎編), 490(17) (1997)

1997 年度 実績報告書

血液流動性維持機構の分子細胞生物学的研究-特にプロテインC凝固制御系における血管内皮細胞膜受容体の構造・機能相関の解析-

研究代表者

鈴木 宏治 三重大学, 医学部, 教授 (70077808)

研究成果

[文献書誌] Hayashi,T., Usui,T., Suzuki,K., et al.: "Regulation of the human protein C inhibitor gene expression in HepG2 cells:Role of Spl and AP2." Biochem.J.(in press). (1998)

[文献書誌] Nishioka,J., Ma,N., Suzuki,k., et al.: "Protein C inhibitor secreted from activated platelets efficiently inhibits activated protein C on phosphatidylethanolamine of platelet membrane and microvesicles." J.Biol.Chem.(in press). (1998)

[文献書誌] Usui,M., Hayashi,T., Suzuki,K., et al.: "Canine lipopolysaccharide-binding protein:cDNA cloning and its tissue distribution of canine model of extended hepatectomy." Biochim.Biophys.Acta. (in press). (1998)

[文献書誌] Deguchi,H., Takeya,H., Suzuki,K., et al.: "Dilazep,an adenosine potentiator, inhibits tissue factor expression in the endothelial cells stimulated with tumor necrosis factor-α,thrombin or phorbol 12-myristate 13-acetate." Blood. 90. 2345-2356 (1997)

[文献書誌] Takeya,H., Mori,T., Suzuki,K., et al.: "Anti-β2-glycoprotein I(β2GPI)monoclonal antibodies with lupus anticoagulant-like activity enhance the β2GPI bindong to phospholipids." J.Clin.Invest.99. 2260-2268 (1997)

[文献書誌] Deguchi,H., Takeya,H., Suzuki,K., et al.: "Kringle I domain of prothrombin interacts with factor Va during the assembly of the prothrombinase complex." Biochem.J.321. 729-735 (1997)

[文献書誌] 鈴木 宏治: "Annual Review 血液 1998" 中外医学社(高久 史麿 他編), 245(10) (1998)

[文献書誌] 鈴木 宏治: "DIC Ology" メジカルレビュー社(丸山 征郎 編), 490(17) (1997)

1997 年度実績報告書

鈴木宏治三重大学, 医学部, 教授 (70077808)

[文献書誌] 鈴木宏治: "Annual Review 血液 1998" 中外医学社(高久史麿他編), 245(10) (1998)

[文献書誌] 鈴木宏治: "DIC Ology" メジカルレビュー社(丸山征郎編), 490(17) (1997)