1999 年度実績報告書

血小板粘着・凝集に関わる調節タンパク質の構造・機能相関

研究課題

研究課題/領域番号	09480155
研究機関	藤田保健衛生大学
研究代表者	千谷晃一藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 教授 (60179942)
研究分担者	松原守藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 助手 (90288481) 林宣宏藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 助手 (80267955) 松井太衛藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 講師 (90183946) 藤村吉博奈良県立医科大学, 輸血部, 教授 (80118033) 浜子二治藤田保健衛生大学短期大学, 衛生技術科, 助教授 (80180933)
キーワード	血小板凝集 / フォンビルブラント因子(vWF) / vWF活性化因子 / ビチセチン / コーシャギン / 生理的vWFプロテナーゼ / ジスインテグリン / 胎盤特異的ectoATPDase
研究概要	フォンビルブランド (vWF)分子上のビチセチン結合部位の探索:平成9年度に報告した、新しいvWF活性化因子であるビチセチンと、従来のポトロセチンとの作用機作を明らかにするため、本年度は、ビチセチンの結合するvWFのA-1ループドメインの種々の変異体をヒト由来の培養細胞で発現させ、ビチセチンとの結合能を解析した。その結果、ボトロセチン結合部位の比較的近傍に結合することが判明した(論文作成中)。コーシャギンの全アミノ酸配列の決定:Naja kaouthia蛇毒より新しく見出した、vWFに特異的に結合し、一箇所を切断するコーシャギンの全アミノ酸配列を決定した。コーシャギンはメタロプロテアーゼ、ジスインテグリン様ドメイン、Cys-richドメインからなるが、ジスインテグリンドメインとは別に、そのC末側下流にRGD配列を持つユニークな蛇毒メタロプロテアーゼであることを発見した。(論文作成中)。生理的vWF分解プロテアーゼの精製:ヒト血漿中にも、vWFを特異的に分解し、その活性を調節しているvWFメタロプロテーゼが存在し、その欠損は血栓症などの疾病を惹起することが知られているが、未だその本体は不明である。本年度、リストセチン凝集阻害活性とマルチマー切断活性を指標として、我々もこの酵素の精製を試みた。胎盤特異的ecto-ATPDaseのcDNAクローニング:昨年度、強力な血小板凝集惹起物質であるADPを分解するecto-ATPDaseを胎盤より精製し、そのN-末端部分アミノ酸配列を解析したところ、既知の酵素のアイソフォームであることが判明した。その知見に基づき、胎盤cDNAライブラリーよりクローニングを行ったところ、2種の異なるcDNAが単離された(FEBS Lett.(1999)453,335-340)。現在、それらの組織分布などの解析を行っている。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Megidish, T., et al.: "Endogenous Substrates of Sphingosine-Dependent Kinases (SDKs) Are Chaperone Proteins : Heat Shock proteins, Glucose-Regulated Proteins, Protein Disulfide Isomerase, and Calreticulin"Biochemistry. 38. 3369-3378 (1999)
[文献書誌] Miura, S., et al.: "Total Inhibition of High Shear Stress Induced Platelet Aggregation by Homodimeric von Willebrand Factor A1-loop Fragments"Br. J. Haematol.. 105. 1092-1100 (1999)
[文献書誌] Matsui, T., et al.: "ABO Blood Group Antigens on Human Plasma von Willebrand Factor after ABO-Mismatched Bone Marrow Transplantation"Blood. 94. 2895-2900 (1999)
[文献書誌] Matsumoto, M., et al.: "The cDNA Cloning of Human Placental Ecto-ATP Diphophohydrolases I and II"FEBS Lett.. 453. 335-340 (1999)
[文献書誌] Matsui, T., et al.: "Snake Venom Protease Affecting Hemostasis and Thrombosis (Minireview)"Biochim. Biophys. Acta. (in press). (2000)
[文献書誌] 藤村吉博他: "Annual Review血液1999(高久、溝口、小宮山、坂田、金倉編)"中外医学社、東京、. 197-205 (1999)

1999 年度 実績報告書

血小板粘着・凝集に関わる調節タンパク質の構造・機能相関

研究代表者

千谷 晃一 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 教授 (60179942)

研究成果

[文献書誌] Megidish, T., et al.: "Endogenous Substrates of Sphingosine-Dependent Kinases (SDKs) Are Chaperone Proteins : Heat Shock proteins, Glucose-Regulated Proteins, Protein Disulfide Isomerase, and Calreticulin"Biochemistry. 38. 3369-3378 (1999)

[文献書誌] Miura, S., et al.: "Total Inhibition of High Shear Stress Induced Platelet Aggregation by Homodimeric von Willebrand Factor A1-loop Fragments"Br. J. Haematol.. 105. 1092-1100 (1999)

[文献書誌] Matsui, T., et al.: "ABO Blood Group Antigens on Human Plasma von Willebrand Factor after ABO-Mismatched Bone Marrow Transplantation"Blood. 94. 2895-2900 (1999)

[文献書誌] Matsumoto, M., et al.: "The cDNA Cloning of Human Placental Ecto-ATP Diphophohydrolases I and II"FEBS Lett.. 453. 335-340 (1999)

[文献書誌] Matsui, T., et al.: "Snake Venom Protease Affecting Hemostasis and Thrombosis (Minireview)"Biochim. Biophys. Acta. (in press). (2000)

[文献書誌] 藤村 吉博他: "Annual Review血液1999(高久、溝口、小宮山、坂田、金倉編)"中外医学社、東京、. 197-205 (1999)

1999 年度実績報告書

千谷晃一藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 教授 (60179942)

[文献書誌] 藤村吉博他: "Annual Review血液1999(高久、溝口、小宮山、坂田、金倉編)"中外医学社、東京、. 197-205 (1999)