肝細胞増殖因子(HGF)の医薬への応用に向けての活性制御因子の生体内動態の解析

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09480161
• 研究機関: 東京工業大学
• 研究代表者: 喜多村 直実 東京工業大学, 生命理工学部, 教授 (80107424)
• キーワード: 肝細胞増殖因子 / 肝障害 / HGF activator / HGF activator inhibitor / Hrs

研究概要

肝細胞増殖因子(HGF)は強力な肝再生因子であり、現在肝疾患の治療薬としての開発が進められている。HGFの活性は細胞外、細胞内の種々の因子により制御されている。本研究ではそれらの因子についてHGF活性の制御との関係において解析し、以下の結果を得た。
1.肝障害時にHGFを活性化するセリンプロテアーゼとして同定されているHGF activator(HGFA)について、肝障害時における動態を解析したところ、HGFAのmRNA量が肝障害に伴って増加することが明らかになった。またHGFA自身の活性化も肝障害に伴って起こっていることが明らかになった。
2.HGFAの活性を阻害するインヒビターとして2種類のHGFA inhibitor(HAI)が精製されている。1型HAIについては、cDNAクローニングにより膜結合型として合成されプロセシングにより細胞外に分泌されると推定されている。1型HAIに対する抗体を作成し、イムノブロット法で1型HAIの動態を解析したところ、膜結合型1型HAIが同定され、また2段階のプロセシングにより、活性の高い1型HAIが細胞外に分泌されてくることが明らかになった。2型HAIについて、cDNAクローニングにより構造解析したところ、1型HAIと同様膜結合型として合成され、プロセシングにより細胞外に分泌されることが明らかになった。
3.細胞内においてHGFの活性を制御する新しいシグナル伝達分子として、HrsとHbpが同定されている。このHrs・Hbp経路と相互作用する分子を検索し、HbpのSH3ドメインに結合する分子としてUbiquitin C-terminal hydrolaseを同定した。この結果、Hrs・Hbpはこの酵素と相互作用することによりHGF/受容体複合体の細胞内分解に関与することが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] A.Okajima: "Induction of hepatocyte growth factor activator mRNA in the liver following tissue injury and acute inflammation." Hepatology. 25. 97-102 (1997)
• [文献書誌] T.Shimomura: "Hepatocyte growth factor activator inhibitor,a novel Kunitz-type serine protease inhibitor." J.Biol.Chem.272. 6370-6376 (1997)
• [文献書誌] M.Kaibori: "Stimulation of liver regeneration and function after partial hepatectomy in cirrhotic rats by continuous infusion of recombinant human hepatocyte growth factor." J.Hepatology. 27. 381-390 (1997)
• [文献書誌] M.Komada: "Hrs,a tyrosine kinase substrate with a conserved double zinc finger domain,is localized to the cytoplasmic surface of early endosomes." J.Biol.Chem.272. 20538-20544 (1997)
• [文献書誌] Y.Kinoshita: "Production and activation of hepatocyte growth factor during the healing of rat gastric ulcers." Digestion. 58. 225-231 (1997)
• [文献書誌] T.Kawaguchi: "Purification and cloning of hepatocyte growth factor activator inhibitor type 2,a Kunitz-type serine protease inhibitor." J.Biol.Chem.272. 27558-27564 (1997)