1997 年度実績報告書

プロラクチンによる両生類精原細胞のアポトーシス誘起機構

研究課題

研究課題/領域番号	09480206
研究機関	熊本大学
研究代表者	安部眞一熊本大学, 理学部, 教授 (90109637)
研究分担者	山本卓熊本大学, 自然科学研究科, 助手 (90244102)
キーワード	イモリ / 精原細胞 / 減数分裂開始 / アポトーシス / プロラクチン / プロラクチン受容体 / FSH / FSH受容体
研究概要	(1)イモリFSH受容体cDNAのクローニング: イモリFSH受容体の細胞外領域のcDNA断片をRT-PCR法によりクローニングした。さらに、イモリ精巣のcDNAライブラリーより全長のcDNAをクローニングした。イモリFSH受容体は696アミノ酸残基からなり、哺乳類のFSH受容体と約70%の相同性が見られた。ノーザンブロット解析の結果、約6.5kbの単一の転写産物が精巣で検出された。単離した精原細胞および体細胞(殆どがセルトリ細胞)から調製したmRNAを鋳型にRT-PCRを行ったところ、体細胞のみに単一のバンドが得られた。このことから、イモリ精巣においてFSHRmRNAはセルトリ細胞のみに発現していることが示唆された。 (2)イモリ・プロラクチン受容体cDNAのクローニング: イモリ腎臓のcDNAを鋳型としたRT-PCRによりプロラクチン受容体遺伝子の断片をクローニングした。さらにcDNAライブラリーのスクリーニング及び3′RACE法により全長の遺伝子をクローニングした。イモリプロラクチン受容体遺伝子は626アミノ酸残基からなり、哺乳類のそれと49-52%の相同性が見られた。ノーザン解析の結果、脳と腎臓に強い発現が見られた。RT-PCR解析の結果、精巣、卵巣、肝臓にも発現が確認された。 (3)イモリ・プロラクチン抗体投与による精原細胞のアポトーシス抑制: イモリを低温に置いたときに起こる精原細胞のアポトーシスが、下垂体からのプロラクチン分泌増加によるものかどうかを調べるため、イモリ・プロラクチン抗体を低温下でイモリ体腔へ投与したところ、少なくとも3日間は精原細胞のアポトーシスがほぼ完全に抑制された。このことから、イモリが低温にさらされると、血中のプロラクチン濃度が上昇し精原細胞にアポトーシスを起こすことが示唆された。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] 安部眞一・山本卓: "両生類における精子分化機構" 「タンパク質・核酸・酵素」(共立出版)増刊号生殖細胞の発生と性分化. (印刷中). (1998)
[文献書誌] Abe, S.-I., Nakaishi, Y., Nakayama, Y. and Yamamoto, T.: "Proliferation of newt spermatogonia and initiation of meiosis in vitr6 by mammalian FSH and insulin." Proceedings of the XIIIth International Congress of Comparative Endocrinology, Yokohama, 1997. 329-334 (1997)
[文献書誌] Abe, S.-I. and Yamamoto, T.: "Proliferation of newt spermatogonia in vitro and expression of activ in β subunit genes by sertoli Cells." J. Rep. Dev.43. 97-98 (1997)
[文献書誌] Ito, M., Abe, S-I., Sekizawa, Y. and Kobayashi H.: "Lethal effects of lysenin a novel protein isolated from the coelomic fluid of the earthworm Ersenia foetida on the spermatozoa of the african clawed frog and the mouse." Biomed. Res.18. 399-404 (1997)
[文献書誌] Yoshinobu, K., Kondo, T., Takai, M., Katagiri, Ch., Tou, H., Abe, S-I: "Primary structures of sperm-specific basic nuclear proteins and those gene expressions in Japanese newt, Cynops Pyrrhogaster." Mol. Repr. Dev.46. 243-251 (1997)
[文献書誌] 安部眞一・山本卓: "「両生類の発生生物学」(片桐千明編)" 北海道大学図書刊行会(印刷中), (1998)

1997 年度 実績報告書

プロラクチンによる両生類精原細胞のアポトーシス誘起機構

研究代表者

安部 眞一 熊本大学, 理学部, 教授 (90109637)

研究成果

[文献書誌] 安部眞一・山本卓: "両生類における精子分化機構" 「タンパク質・核酸・酵素」(共立出版)増刊号 生殖細胞の発生と性分化. (印刷中). (1998)

[文献書誌] Abe, S.-I., Nakaishi, Y., Nakayama, Y. and Yamamoto, T.: "Proliferation of newt spermatogonia and initiation of meiosis in vitr6 by mammalian FSH and insulin." Proceedings of the XIIIth International Congress of Comparative Endocrinology, Yokohama, 1997. 329-334 (1997)

[文献書誌] Abe, S.-I. and Yamamoto, T.: "Proliferation of newt spermatogonia in vitro and expression of activ in β subunit genes by sertoli Cells." J. Rep. Dev.43. 97-98 (1997)

[文献書誌] Ito, M., Abe, S-I., Sekizawa, Y. and Kobayashi H.: "Lethal effects of lysenin a novel protein isolated from the coelomic fluid of the earthworm Ersenia foetida on the spermatozoa of the african clawed frog and the mouse." Biomed. Res.18. 399-404 (1997)

[文献書誌] Yoshinobu, K., Kondo, T., Takai, M., Katagiri, Ch., Tou, H., Abe, S-I: "Primary structures of sperm-specific basic nuclear proteins and those gene expressions in Japanese newt, Cynops Pyrrhogaster." Mol. Repr. Dev.46. 243-251 (1997)

[文献書誌] 安部眞一・山本卓: "「両生類の発生生物学」(片桐千明編)" 北海道大学図書刊行会(印刷中), (1998)

1997 年度実績報告書

安部眞一熊本大学, 理学部, 教授 (90109637)

[文献書誌] 安部眞一・山本卓: "両生類における精子分化機構" 「タンパク質・核酸・酵素」(共立出版)増刊号生殖細胞の発生と性分化. (印刷中). (1998)