|
1.マウスメラノーマ細胞株において機能するインテグリンαv遺伝子プロモーター領域の詳細な同定(研究代表者、林正男)
我々は、マウスインテグリンプロモーター領域をゲノムライブラリーより、クローニングすることに成功し、翻訳開始約1.8kbpの塩基配列を決定した。さらに、インテグリンαvプロモーター領域(-108bpから+1bp)において3箇所の転写制御部位があることをマウスメラノーマ細胞B16F10において同定した。第1の部位、-27bpから-16bp、に転写因子Sp1が結合すること見いだした。また第2の部位、-61bpから-54bp、に転写因子Ets-1が結合することを見いだした。そして第3の部位、-106bpから-98bp、にEtsファミリーが結合することを明らかにした。以上の3箇所の転写因子結合部位は、それぞれ欠失や塩基置換をすることにより著しくプロモーター活性が減少した。これらの結果は、インテグリンαvプロモーター活性がEts及びSp1により制御されていることを明らかにしている。
2.ビトロネクチンプロモーター領域の解析(研究分担者、宮本泰則)
ビトロネクチンプロモーター領域のうち、-19bpから+54bpの領域が転写に必須であることを見いだした。この領域には、TATAボックスがなく、肝癌HepG2細胞の核タンパク質と単一の複合体を形成することを見いだした。また、未同定であった翻訳開始1.8kbp上流から3.9kbp上流までの約2kbpの塩基配列を決定した。
|
