| 研究概要 |
本研究は,遺伝子工学的手法を用いて現在までに作成された弱毒ウイルスの遺伝子解析と弱毒化をもたらす塩基配列部位の決定,転写系による弱毒ウイルスの遺伝子保存と安定供給の確立,転写系を応用した人工的弱毒ウイルスの作成と強毒ウイルスに対する干渉効果の検定,および旧来の方法による弱毒ウイルスの作成を行うなかでウイルスの迅速弱毒化と早期検定法の確立を目標として実施された。その結果,
1)キュウリモザイクウイルス(CMV),カンキツトリステザウイルス(CTV),キュウリ緑斑モザイクウイルスの弱毒株について全塩基配列を決定し,さらに全長cDNAからの転写系の確立を目指した。
2)トマトモザイクウイルスの遺伝子解析として、クラゲの蛍光色素遺伝子を結合させた。
3)作出したCMV弱毒株のメロンとトマトにおける干渉効果,ズッキー二黄斑モザイクウイルスの弱毒株作出と干渉効果について試験し,有望弱毒株を得た。
4)CMVの弱毒株と強毒株を競合接種し,弱毒株の干渉効果が不完全あるいは完全に発現しているタバコにおいてウイルスゲノムの動態を調べ,干渉作用の機構解明を行った。
5)CMV,CTV,ヤマノイモモザイクウイルスなどの弱毒株の塩基配列を検討し,IC-RT-PCR法による迅速簡便な弱毒/強毒株の検定識別方法を確立した。
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