1998 年度実績報告書

低分子量G蛋白質とその標的蛋白質の機能修飾物質の開発と有効利用

研究課題

研究課題/領域番号	09557012
研究機関	広島大学
研究代表者	菊池章広島大学, 医学部, 教授 (10204827)
研究分担者	中田元巳住友電工, バイオメディカル研究部, 主査(研究職) 岸田昭世広島大学, 医学部, 助手 (50274064) 小山眞也広島大学, 医学部, 助教授 (00186834)
キーワード	低分子量G蛋白質 / Ral / RalBP1 / POB1 / エンドサイトーシス / EHドメイン
研究概要	昨年度はRalの抗体や変異体を作製して、Ralの機能解析に応用することを試みた。本年度はRalの機能をさらに明らかにするためにRalの下流分子を探索した。Ralの標的蛋白質はRalBP1である。RalBP1はRacやCDC42に対するGAP活性を有するために、RalからRacやCDC42へ伝達されるシグナル伝達経路が存在すると考えられていたが、これまでにこの可能性を支持する結果は得られなかった。酵母のtwo hybrid法にてRalBP1と結合する蛋白質をスクリーニングした。その結果、新規蛋白質を見出し、POB1(Partner of RalBP1)と名付けた。POB1はRalBP1のRal結合部位とは異なる部位に結合して、Ral、RalBP1、 POB1の三者は複合体を形成した。さらに、POBlはGrb2と結合し、EGF刺激によりチロシンリン酸化され、EGF受容体と複合体を形成した。 POB1のN末端側にはEHドメインと呼ばれる領域が存在した。EHドメインは酵母のエンドサイトーシスに必須の因子であるPan1やEnd3にも認められ、その機能にEHドメインが重要であることが明らかにされている。POB1のC端側半分を細胞内に導入するとEGFとインシュリン受容体のエンドサイトーシスが阻害された。したがって、POB1はリガンド依存性のエンドサイトーシスを制御すると考えられる。Ralが細胞膜と共に種々の細胞内小胞や分泌小胞に局在することをあわせて考えると、Ral/RalBP1/POB1を介するシグナル伝達系がエンドサイトーシスを制御する可能性が高い。

研究成果
(12件)

すべてその他

すべて文献書誌 (12件)

[文献書誌] Ikeda,M.: "Identification and characterization of a novel protein interacting with Ral-binding protein1,a putative effector protein of Ral." J.Biol.Chem.273・2. 814-821 (1998)
[文献書誌] Shirouzu,M.: "Interactions of the amino acid residues at position 31 of the c-Ha-Ras protein with Raf-1 and RalGDS." J.Biol.Chem.273・13. 7737-7742 (1998)
[文献書誌] Kigawa,T.: "Solution structure of the Ras-binding domain of RGL." FEBS lett.441・3. 413-418 (1998)
[文献書誌] Ikeda,S.: "Axin,a negative regulator of the Wnt signaling pathway,forms a complex with GSK-3β and β-catenin and promotes GSK-3β-dependent phosphorylation of β-catenin." EMBO J.17・5. 1371-1384 (1998)
[文献書誌] Yamamoto,H.: "Axil,a member of the Axin family,interacts with both glycogen synthase kinase 3β and β-catenin and inhibits axis formation of Xenopus embryos." Mol.Cell.Biol.18・5. 2867-2875 (1998)
[文献書誌] Kishida,S.: "Axin,a negative regulator of the Wnt signaling pathway,directly interacts with adenomatous polyposis coli and regulates the stabilization of β-catenin." J.Biol.Chem.273・18. 10823-10826 (1998)
[文献書誌] Matsubara,K.: "Plasma membrane recruitment of RalGDS is critical for Ras-dependent Ral Activation." Oncogene. 18・6. 1303-1312 (1999)
[文献書誌] Koshiba,S.: "Solution structure of the Eps15 homology domain of a human POB1(partner of RalBP1)." FEBS lett.442・2-3. 138-142 (1999)
[文献書誌] Kishida,M.: "Axin prevents Wnt-3a-induced accumulation of β-catenin." Oncogene. 18・4. 979-985 (1999)
[文献書誌] Sawamoto,K.: "Ectopic expression of mutationally-activated RalGTPase inhibits cellshape changes during Drosophila eye development." Oncogene. (in press). (1999)
[文献書誌] Kishida,S.: "DIX domains of Dvl and Axin are necessary for protein interactions and their ability to regulate β-catenin stability." Mol.Cell.Biol.(in press). (1999)
[文献書誌] Yamamoto,H.: "Phosphorylation of Axin,a Wnt signal negative regulator,by glycogen synthase kinase-3β regulates its stability." J.Biol.Chem.(in press). (1999)

1998 年度 実績報告書

低分子量G蛋白質とその標的蛋白質の機能修飾物質の開発と有効利用

研究代表者

菊池 章 広島大学, 医学部, 教授 (10204827)

研究成果

[文献書誌] Ikeda,M.: "Identification and characterization of a novel protein interacting with Ral-binding protein1,a putative effector protein of Ral." J.Biol.Chem.273・2. 814-821 (1998)

[文献書誌] Shirouzu,M.: "Interactions of the amino acid residues at position 31 of the c-Ha-Ras protein with Raf-1 and RalGDS." J.Biol.Chem.273・13. 7737-7742 (1998)

[文献書誌] Kigawa,T.: "Solution structure of the Ras-binding domain of RGL." FEBS lett.441・3. 413-418 (1998)

[文献書誌] Ikeda,S.: "Axin,a negative regulator of the Wnt signaling pathway,forms a complex with GSK-3β and β-catenin and promotes GSK-3β-dependent phosphorylation of β-catenin." EMBO J.17・5. 1371-1384 (1998)

[文献書誌] Yamamoto,H.: "Axil,a member of the Axin family,interacts with both glycogen synthase kinase 3β and β-catenin and inhibits axis formation of Xenopus embryos." Mol.Cell.Biol.18・5. 2867-2875 (1998)

[文献書誌] Kishida,S.: "Axin,a negative regulator of the Wnt signaling pathway,directly interacts with adenomatous polyposis coli and regulates the stabilization of β-catenin." J.Biol.Chem.273・18. 10823-10826 (1998)

[文献書誌] Matsubara,K.: "Plasma membrane recruitment of RalGDS is critical for Ras-dependent Ral Activation." Oncogene. 18・6. 1303-1312 (1999)

[文献書誌] Koshiba,S.: "Solution structure of the Eps15 homology domain of a human POB1(partner of RalBP1)." FEBS lett.442・2-3. 138-142 (1999)

[文献書誌] Kishida,M.: "Axin prevents Wnt-3a-induced accumulation of β-catenin." Oncogene. 18・4. 979-985 (1999)

[文献書誌] Sawamoto,K.: "Ectopic expression of mutationally-activated RalGTPase inhibits cellshape changes during Drosophila eye development." Oncogene. (in press). (1999)

[文献書誌] Kishida,S.: "DIX domains of Dvl and Axin are necessary for protein interactions and their ability to regulate β-catenin stability." Mol.Cell.Biol.(in press). (1999)

[文献書誌] Yamamoto,H.: "Phosphorylation of Axin,a Wnt signal negative regulator,by glycogen synthase kinase-3β regulates its stability." J.Biol.Chem.(in press). (1999)

1998 年度実績報告書

菊池章広島大学, 医学部, 教授 (10204827)