| 研究課題/領域番号 |
09557132
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
加藤 秀則 九州大学, 生体防御医学研究所, 講師 (60214392)
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| 研究分担者 |
和氣 徳夫 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (50158606)
西田 純一 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (40264113)
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| キーワード | 1番染色体 / 子宮体癌 / 微小核融合 / 癌抑制遺伝子 / YAC / STSマーカー / STFs |
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| 研究概要 |
ヒト1番染色体上の子宮内膜癌増殖抑制遺伝子座を明らかにする目的で、まず始めにヒト1番染色体短腕のみを持つGM1173と長腕のq12からq31までの欠損をもつAqD1Q細胞を子宮内膜癌細胞株HHUAに微小核融合し、増殖抑制を観察した。その結果GN1173では増殖抑制はみられなかったが、A9D1Q細胞の移入では、ほとんどの細胞で細胞死が観察された。これは子宮内膜増殖遺伝子がヒト1番染色体長腕のq31より遠位に存在することを示すものであった。
つぎにさらに詳細にこの遺伝子座を同定するために、ヒト1番染色体に1000-3000radの放射線照射を行い様々な長さのSTFsを作製した。10・50Mbの長さのq31・telの領域内に存在するSTFsがおよそ30種類得られ、この中から有用である5つのクローンを選択しHHUAに微小核融合を行った。この結果子宮内膜癌増殖遺伝子座がヒト1番染色体長腕遠位部の、q31・41の間に存在することが明らかになった。より詳細な位置を決定するために(1)テロメアベクターに、この領域内に存在するマーカーであるD1S103からbubble PCRで得られたDNA断片を組み込みA9D1Qにターゲティングし、D1S103より遠位が欠損した染色体の作製を試みた。現在のところ目的のクローンは得られておらず、手法の改良などを検討している。(2)q32・41間のSTSマーカーを用い、60例の臨床癌検体についてLOH解析を行った。約50%の症例がD1S225-D1S459の間に異常をもつことが明らかとなった。この領域をカバーするYACクローンを得、HHUAに導入したところ1番染色体の微小核融合の場合と同じく細胞死が誘導され、親細胞のもつ高いテロメラーゼ活性も抑制されていた。これらのことよりこのYACクローンがもつゲノム領域(約1Mb)に子宮内膜癌増殖抑制遺伝子が存在すると考えられた。
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