DNaseγ抗体を用いた小児がんアポトーシス診断法の開発

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09557138
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 上井 義之 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (70177567)
• 研究分担者: 田沼 靖一 東京理科大学, 薬学部, 教授 (10142449)
• キーワード: アポトーシス / 神経芽細胞腫 / DNA断片化 / DNaseγ / エンドヌクレアーゼ

研究概要

アポトーシスは遺伝子にあらかじめ組み込まれたプログラムの発現に基づいておこる態動的な細胞死であり、本来は、生体の中で不要になった細胞など(余剰細胞、老化細胞など)や異常をきたして有害となる細胞(癌細胞、ウイルス感染細胞)を除去し、生命の形づくりや維持に必須な機能を果たしている。最近、その制御異常が、癌、自己免疫疾患、AIDSなどのウイルス感染症、アルツハイマー病などの神経変性疾患などの様々な疾患の発症に深く関わっていることが明らかになってきている。我々は、アポトーシスの定義ともなっているDNAのヌクレオソーム単位での断片化を司るDNAエンドヌクレアーゼを同定し、DNaseγと名付けた。また、そのcDNAクローニング、及び抗体作製を行った。
小児がん研究の分野においては、自然退縮、自然治癒を呈するembryonal tumorsが多くみられ、最近、この現象はアポトーシスによるものであることが示唆されている。我々はこれまでに、神経芽細胞腫培養株株をアポトーシスの観点から調べ、抗癌剤によるアポトーシス誘導能に違いがあることを見出している。そこで、これらの神経芽細胞腫培養株において、アポトーシス誘発能とDNaseγ発現レベルとの関係について抗DNaseγ抗体を用いて検討した。その結果、アポトーシス誘導における、ヌクレオソーム単位でのDNAの断片化能とDNaseγの発現に相関性があることが判明した。

研究成果

• [文献書誌] Tanuma,S., et al.: "Inhibitors of poly(ADP-ribose)polymerase suppress nuclear fragmentation and apoptotic-body formation during apoptosis in HL-60 Cells." FEBS Lett.413. 99-103 (1997)
• [文献書誌] Tanuma,S., et al.: "Purification characterrization and amino acid sequencing of DNase γ from rat spleen." Arch.Biochem.Biophys.346. 15-20 (1997)
• [文献書誌] Tanuma,S., et al.: "Role of(ADP-ribose)n catabolism in DNA repair." Biochem.Biophys.Res.Commun.236. 265-269 (1997)
• [文献書誌] Tanuma,S., et al.: "Purification and properties of DNase γ from apoptotic rat thymocytes." Biochem.J.326. 675-681 (1997)
• [文献書誌] Tanuma,S., et al.: "Occurence of DNase γ-like apoptotic endonucleases in hematopoietic cells in Xenopus Laevis and their relation to metamorphosis." Biochem.Biophys.Res.Commun.231. 305-308 (1997)
• [文献書誌] Tanuma,S., et al.: "Restrictive proteolysis of fodrin to 120 kDa fragment is not catalyzed by calpain during thymic apoptosis." Apoptosis.2. 84-90 (1997)
• [文献書誌] 田沼靖一: "NHKブックス" 遺伝子の夢, 217 (1997)
• [文献書誌] 田沼靖一: "臨床免疫" アポトーシスの分子機構, 183 (1997)