| 研究概要 |
Porphyromonas gingivalisの線毛は本菌の口腔内への付着・定着に重要な役割を果たしており,本菌の歯周病原性と密接な関わりをもつ.本線毛とヒトマトリックスタンパク質であるフィブロネクチン,ラミニン,コラーゲン,およびヒト唾液タンパク質(PRP,PRG,スタセリン),さらにフィブリノーゲン,ヘモグロビンとの結合をBIAcoreを用いて測定したところ,線毛は供試した全てのヒトタンパク質に対し有意の結合能を示した.基質タンパク質に内在する線毛結合部位は同菌の産生するプロテアーゼにより顕在化し,線毛の付着が著しく亢進した.同プロテアーゼはアルギニン残基をC末端に遊離させた.実際に,種々の合成ジペプチドGly-Xを作製し,これを固相化させたアフィニティークロマトグラフィーの結果から,精製線毛がGly-Argと選択的に相互作用することが示された.ついで,P.gingivalisの産生するプロテアーゼで処理したフイブロネクチンに対するL-Argおよびその誘導体の阻害作用を検討した.その結果,GIy-ArgおよびC-末端あるいは両者にArg残基を持つペプチドはいずれも明確な阻害活性を有し,特にブラジキニン(両末端にArgを有する)はL-Arg単独の3000倍にもおよぶ阻害活性を示した.さらに,N-およびC-末端のArg残基を除いたペプチドについて調べた結果,C-末端Argを除去したブラジキンは阻害活性がブラジキニンに比して著しく低下したが,N-末端Argを除いてもほとんど変化が認められなかった.線毛は,フィブロネクチン以外にも供試した全てのヒトタンパク質に対し高い親和性を示した.PRPの線毛との結合領域を含む合成ペプチドの添加により線毛と唾液タンパク質およびコラーゲンとの結合は著明に阻害されたが,フィブロネクチンやラミニンでは著名な阻害効果は認められなかった.以上の結果より,P.gingivalis線毛は種々のヒトタンパク質への結合能を有するが,いくつかの様式が存在することが示唆された.
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