骨髄腫由来の異常タンパク質の高感度、高分離能分析法の開発に関する研究

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09640731
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 真鍋 敬 愛媛大学, 理学部, 教授 (60094281)
• 研究分担者: 島崎 洋次 愛媛大学, 理学部, 助手 (80284389)
• キーワード: 血漿タンパク質 / キャピラリー電気泳動 / 骨髄腫 / 等電点電気泳動 / SDS電気泳動 / 高感度分析 / 高分離能分析 / 2次元ゲル電気泳動

研究概要

2次元ゲル電気泳動とキャピラリー電気泳動によって、骨髄腫患者血漿中の異常タンパク質を高感度に、かつ高性能に検出することが可能となった。2次元ゲル電気泳動とキャピラリー電気泳動を比較すると、2次元ゲル電気泳動では異常タンパク質の等電点と分子サイズを同時に見積もることができるため、タンパク質分子種の同定が容易であるが、定量の面では電気泳動後別に定量操作が必要である。また、ゲル電気泳動も画像処理による定量も手操作が多く、能率の点では優れているとは言い難い。これに対してキャピラリー電気泳動は、泳動中にタンパク質の定量(ピーク高さ)データが得られるうえに、全自動装置による連続分析が可能であるため、きわめて高能率であるといえる。タンパク質の同定に関しては、キャピラリー等電点電気泳動とサイズ分離キャピラリー電気泳動を併用することにより、2次元ゲル電気泳動に近い精度で同定することも可能であると考えられる。
総合的にみれば、今回条件を確立したキャピラリー電気泳動は、骨髄腫患者血清中の異常タンパク質の高感度、高性能検出法としてきわめて有効であり、スクリーニング・同定・定量を同時に行いうる分析法として今後の活用が期待できる。

研究成果

• [文献書誌] 真鍋敬,宮本洋光,岩崎愛子: "Effects of Catholytes on the mobilization of Proteins After Capillary Isoelectric Focusing" Electrophoresis. 18. 92-97 (1997)
• [文献書誌] 真鍋敬,岩崎愛子,宮本洋光: "Separation of Human Plasma/Serum Proteins by Capillary Isoelectric Focusing in the Absence of Denaturing Agents" Electrophoresis. 18. 1159-1165 (1997)
• [文献書誌] 真鍋敬,豊田洋介,宮本洋光: "Carrier-Ampholyte-Based Separation of Basic Proteins Using Micro Two-Dimensional Polyacrylaucide Gel Electrophoresis" Chromatography. 18. 169-174 (1997)
• [文献書誌] 真鍋敬,宮本洋光,大田英人,豊田洋介: "Correlation of Plasma Protein Separation Patterns Obtained by Two-Dimensional Polyacrylaucide Gel Electrophoresis and by Capillary Electrophoresis" Electrophoresis. 19. 1319-1324 (1998)
• [文献書誌] 真鍋敬,大田英人,向井準: "Size Separation of Sodium Dodeyl Salfate Complexes of Human Plasma Proteins by Capillary Electrophoresis Employing Linear Polyacrylaucide as a Sieving Polyme" Electrophoresis. 19. 2308-2316 (1998)
• [文献書誌] 島崎洋次,小原清,真鍋敬: "Removal of Specific Protein Spots on the Patterns of Non-Denaturing Two-Dimensional Electrophoresis Using Protein A Agarose and Antibodies" J.Biochem.Biophys.Methods. 37. 1-4 (1998)
• [文献書誌] 共著者117名(真鍋敬): "最新電気泳動実験法" 医歯薬出版(日本電気泳動学会編集), 470(15) (1999)