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申請者は無傷培養牛副腎髄質クロマフィン細胞において、従来、受容体刺激等で生成が変動しないと考えられていたイノシトール五リン酸(lnsP_5)、イノシトール六リン酸(lnsP_6)が、各種刺激に伴い急速に生成される事を発見したが、そのの生成経路や生理的意義は不明であった。lnsP_5・lnsP_6の開口分泌における役割を明らかにするため、[^3H]イノシト-ルで標識した高透過性副腎髄質クロマフィン細胞を用いカルシウム刺激によって、細胞内及び細胞外に蓄積されるlnsP_5・lnsP_6を測定した。その結果、カルシウム刺激により刺激後15秒をピークとして細胞外にlnsP_5・lnsP_6が有意に放出さっることを見出した。またカテコラミン分泌はこの時間経過より遅れ惹起されること、さらにlnsP_5・lnsP_6添加によりカテコラミン分泌が抑制されることを見い出した。さらに、シナプトタグミンのC2Aドメインの抗体によりカルシウム刺激によるlnsP_5・lnsP_6の細胞外への放出が完全に抑制された。以上の結果は、シナプトタグミンのC2Bドメインに結合しているlnsP_5・lnsP_6がカテコラミン分泌を抑制的に制御しておりCa^<2+>流入によるC2AドメインへのCa^<2+>結合により、lnsP_5・lnsP_6がC2Bドメインより解離し、抑制的制御が解除され、カテコラミン分泌が進行する可能性を示唆するものと考えられる。一方、無傷単一培養牛副腎髄質クロマフィン細胞からのカテコラミン分泌過程を微少炭素線維に電極を用い測定し、再現性良い結果が得られる実験系の確率をめざした。基本的な方法・設備もほぼ整い、基礎的実験データーが得られた。細胞内微量注入したイノシトール六リン酸の作用を検討したところ、ニコチンによるスパイクを70%以上抑制した。この結果は、上記の可能性を強く示唆している。
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