肝臓の分化誘導に関与する転写制御因子の発現と機能

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09670120
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 秋田大学
• 研究代表者: 杉山 俊博 秋田大学, 医学部, 教授 (00127242)
• 研究分担者: 三浦 直行 秋田大学, 医学部, 助教授 (40165965)
• キーワード: oval cell / LEC ラット / 肝転写因子 / 肝細胞分化 / HNF-3β / 肝臓始原細胞

研究概要

肝臓始原細胞(oval cell)は、銅異常蓄積のために生後3-4か月において劇症肝炎を起こしたLECラット肝臓からコラ-ゲナーゼ灌流法を用いて分離し、oval cell株を樹立することができた。in vitroでは肝細胞転写因子HNF-3βのみの発現を認めたことにより、肝臓細胞としては未分化な状態にあると思われた。しかし、in vivoでは肝細胞に分化しうることを明かにできた。さらに我々はすでにHNF‐1αのcDNAと抗体を作製しており、肝細胞分化の良いマーカーであることを明らかにしてきた。oval cellにHNF‐1αのcDNAを導入した結果、永久株の樹立はできなかった。
我々の樹立したoval cellを無アルブミンラットに移植したところ、移植された細胞は肝細胞に形態学的にも変化し、また免疫組織学的にもアルブミンの産生が認められた。一方、in vitro系では胆管上皮様の形態が観察された。このことは、我々が樹立したoval cellは、肝細胞と胆管上皮細胞の両方へ分化するように運命づけられている、最終分化の前の状態にあることを示唆している。肝臓の分化に伴って、数多くの遺伝子が特異的に発現される。これらの肝特異的転写因子は、肝細胞の分化過程において順次階層的に発現し、最終的に成熟した肝臓組織を形成すると思われるが、本年度はHNF-3βの発現を検討したが、今後、その他の転写因子の発現制御機構との関連をさらに詳しく検討する必要がある。

研究成果

• [文献書誌] Terad,K: "Restoration of holoceruloplasmin synthesis in Lec rat after infusion or recombinant adenovirus bearing WND cDNA." J. Biol. Ghem.273. 1815-1820 (1998)
• [文献書誌] Yasui,O.: "Isolation of oval cells from Long-Evans Cinnamon rats and their transformation into hepatocytes in vivo in the rat liver." Hepatology. 25. 329-334 (1997)
• [文献書誌] Yang,X-L: "Two forms of Wilson disease proteins produced by alternative splicing are localized in distinct cellular compartments." Biochem. J.326. 897-902 (1997)
• [文献書誌] Miura,N.: "Isolation of the mouse(MFH-1)and human(FKHL)14 Mesenchyme Fork Head-1 genes reveals conservation of their gene and protein structures." Genomics. 41. 489-492 (1997)
• [文献書誌] Hirasawa,F.: "The effect of silver administration on the biosynthesis and molecular properties of rat ceruloplasmin." Biochim. Biophys. Acta.1336. 195-201 (1997)
• [文献書誌] Iida,K.: "Essential roles of the winged helix transcription factor MFH-1 in aortic arch patterning and skeletogenesis." Development. 124. 4627-4638