動物個体に投与した機能性核酸分子リボザイムによる癌遺伝子発現の特異的抑制

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09670239
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 東海大学
• 研究代表者: 鬼島 宏 東海大学, 医学部, 講師 (90204859)
• 研究分担者: 中村 雅登 東海大学, 医学部, 講師 (00164335) ; 山崎 等 東海大学, 医学部, 講師 (20191273)
• キーワード: 機能性核酸 / リボザイム / 遺伝子発現制御 / 癌遺伝子 / ras遺伝子 / 膵臓癌

研究概要

ras癌遺伝子の点突然変異はヒト癌を含む多くの癌で高頻度にみられ、その発生・増殖に関与していると考えられている。本研究では、細胞内の変異型ras癌遺伝子の発現をハンマーヘッド型リボザイムを用いて特異的に抑制し、それにより個体レベルで癌の発生・増殖を抑制することを試みる。
平成9年度においては以下の研究をすすめた。
1.活性型K-ras癌遺伝子を標的とするリボザイムの作成:
ヒト腫瘍ヌードマウス移植株に活性型K-ras癌遺伝子標的リボザイムを導入する目的で、リボザイムを組み込んだアデノウイルスベクターを作成した。そのリボザイムは、K-rasコドン12がGTTに点突然変異している活性型K-ras mRNAを標的とする。
2.ヒト膵癌細胞系へのリボザイム導入と細胞内でのリボザイム発現の確認:
活性型K-ras癌遺伝子を有するCapan-1ヒト膵癌細胞株を用い、in vitro培養細胞系ならびにin vivo担癌ヌードマウス系で、アデノウイルスベクターによる活性型K-ras癌遺伝子標的リボザイムの遺伝子導入を試みた。培養細胞系・担癌ヌードマウス系ともに、膵癌細胞内にリボザイムが効果的に導入され、その発現も確認された。これに対応して、活性型K-ras癌遺伝子発現の特異的抑制が確認され、さらに膵癌細胞の増殖抑制も観察された。
以上の研究の結果、その成果をまとめ、現在、論文投稿中である。

研究成果

• [文献書誌] Nakamura,M.: "Gene Expression of Granulocyte Colony Stimulating Factor(G-CSF)in Non-Small Cell Lung Cancer" Anticancer Research. 17. 573-576 (1997)
• [文献書誌] Abe,Y.: "A Xenograft Line of Human Teratocarcinoma Established by Serial Transplantation in Sever Combined Immunodeficient(SCID)Mice" Acta Pathologica,Microbiologica et Immunologica Scandinavica(APMIS). 105. 283-289 (1997)
• [文献書誌] 鬼島 宏: "リボザイムを用いた遺伝子治療の試み-特にanti-K-rasリボザイムによる膵癌の増殖抑制-" 血液・腫瘍科. 35. 338-346 (1997)
• [文献書誌] Takamiya,Y.: "Murine P-Glycoprotein on Stromal Vessels Mediates Multidrug Resistance in Intracerebral Human Glioma Xenografts" British Journal of Cancer. 76. 445-450 (1997)
• [文献書誌] Tsugu,A.: "Localization of Aberrant Messenger RNA of Epidermal Growth Factor Receptor(EGFR)in Malignant Glioma" Anticancer Research. 17. 2225-2232 (1997)
• [文献書誌] Suto,R.: "A Case of Malignant Schwannoma with Overexpression of Multidrug Resistance Gene(MDR1)after Chemotherapy" Anticancer Research. 17. 2273-2278 (1997)