トキソプラズマ感染細胞におけるシャペロン、トランスポーターの抗原提示機能の解析

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09670264
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 青才 文江 千葉大学, 医学部, 助教授 (80150316)
• 研究分担者: 矢野 明彦 千葉大学, 医学部, 教授 (20135122)
• キーワード: トキソプラズマ / シャペロン / HSP70 / トランスポーター / 抗原提示機能分子 / 遺伝子ワクチン / SAG1遺伝子 / 抗原提示細胞

研究概要

マラリアやAIDSを始め細胞内寄生体感染症に対するワクチン開発(防御免疫の誘導)は世界的に困難をきわめている。我々はトキソプラズマ原虫に代表される細胞内寄生原虫感染における感染細胞内の抗原提示機構及びT細胞エピトープの解析について研究を進め、1) トキソプラズマ感染細胞がトキソプラズマ抗原を細胞内で抗原処理し、MHC分子結合オリゴペプチドとして感染細胞特異的CD4^+CD8^-あるいはCD4^-CD8^+CTLに抗原提示することを明らかにし、2) 感染細胞特異的CTLが認識するMHCクラスI分子結合オリゴペプチド(T細胞エピトープ)のアミノ酸解析に成功し、表面プラズモンレゾナンスにより合成トキソプラズマSAG1ペプチド289-297が感染細胞特異的CD8+CTLに強い抗原性を示すT細胞エピトープであることを報告した。さらに、3) 細胞内蛋白質のフォールディング、オリゴマー形成、分子の膜貫通・移動などの抗原提示機序に不可欠であり、且つその分子構造がMHCクラス1分子に酷似する分子シャペロンの解析から、熱ショック蛋白質HSP70がトキソプラズマ感染宿主細胞における抗原提示機能分子として存在し、トキソプラズマ感染ヒトメラノーマから得たHSP70が感染細胞特異的CTLエピトープとなることを明らかにした。
本年度はさらに、感染細胞内抗原処理・提示機能分子である分子シャペロン、トランスポーターの抗原処理・提示機能の解析および抗原提示機能分子修飾により誘導される細胞性免疫反応を介したワクチン開発を目的として、トキソプラズマ主要表面抗原SAG1遺伝子をマウスTAPトランスポーター欠損腫瘍細胞株RMA.Sに遺伝子導入した。RMA.Sは強力な抗原提示能をもち、このSAG1遺伝子導入抗原提示細胞株でマウスに免疫することにより、トキソプラズマ感染細胞特異的細胞性免疫が誘導されトキソプラズマ強毒株(RH株)感染に対するex-vivoワクチン効果が得られることを明らかにし報告した(Microbiol.Immunol.43(1),87-91,1999)。

研究成果

• [文献書誌] Mun,H-S.,Aosai,F.and Yano,A.: "Role of Toxoplasma gondii HSP70 and Toxoplasma gondii HSP30/bag1 in antibody formation and prophylactic immunity in mice experimentally infected with Toxoplasma gondii." Microbiol.Immunol.in press.(1999)
• [文献書誌] Aosai,F.,Mun,H-S.,Norose,K.,Chen,M.,Hata,H.,Kobayashi,M.,Kiuchi,M.,Stauss,H.J.and Yano,A.: "Protective immunity induced by vaccination with SAG1-gene transfected cells against Toxoplasma gondii-infection in mice." Microbiol.Immunol.43(1). 87-91 (1999)
• [文献書誌] 矢野明彦、文 恵聖、陳 梅、青才文江: "免疫グロブリン別トキソプラズマ抗体測定用試薬トキソIgM-EIA「生研」、IgG-EIA「生研」の評価" 臨床検査機器・試薬. 21(5). 533-538 (1989)
• [文献書誌] F.aosai,H-S.Mun,T-H.Yang,K.Norose,H.Hata,M.Kobayashi,M.Chen,S.Saito,N,Rikihisa,M.Ichionose,A.Yano.: "HSC70-mediated antigen presentation and ex-vivo gene vacclnation with SAG1 to Toxoplasma gondii-infection.ICOPAIX-9th International Congress of parasftology.ed.Isao Tada,Somel Kojima,Mortyasu Tsuji." Blogna,Italy.Monduzzi Editore., (1998)
• [文献書誌] A.Yano,H-S.Mun,T-H.Yang,H.Hata,M.Kobayashi,K.Norose,S.Hayakawa,Y.Tagawa,Y.Iwakura,S.Nakazaki,Y.Nakazaki,S.Sekiva,A.Yamaura,H.Kubosawa,N.Yumoto,F.Aosai.: "Roles of IFN-gamma in effector mechanisms and pathogenicity of HSPs in mice and human infected with Toxoplasma gondii.ICOPA IX-9th International Congress of Parasitology,ed.Isao Tada,Somel Kojima,Moriyasu Tuji." Blogna,Italy.Monduzzi Editore., 10 (1998)