1998 年度実績報告書

ライム病ボレリア接着因子の機能解析とその応用

研究課題

研究課題/領域番号	09670294
研究機関	静岡県立大学
研究代表者	増澤俊幸静岡県立大学, 薬学部, 助教授 (10181645)
研究分担者	柳原保武フィリピン大学, 公衆衛生学部, 客員教授三宅正紀静岡県立大学, 薬学部, 助手 (00295560)
キーワード	ライム病 / ボレリア / 病原因子 / 接着因子 / スフィンゴ糖脂質 / カラクトシルセラミド / Borrelia burgdorferi / グリセルアルデヒド-3-リン酸脱水素酵素
研究概要	ライム病ボレリアの細胞接着因子の存在を明らかにした。神経ボレリア症の発症機構解明のため神経細胞に広く存在するスフィンゴ糖脂質に対するライム病ボレリアの接着性をTLC結合試験法により調べた。ガングリオシドやスルファチドに比べ、中性糖脂質のガラクトシルセラミド(GalCer)に最も高い結合性を示すこと、この接着性が病原性と相関することを明らかにした。GalCerのガラクトースの3位に硫酸基を有するスルファチドに対して殆ど結合せず、脱アジルしたlysoGalCer、過ヨウ素酸処理したGalCerにも結合しないことから、セラミドの脂肪酸部分及び糖が結合に関与していることを明らかにした。スフィンゴ糖脂質結合蛋白質(glycosphingolipid-binding protein,Gbp)の性状解析の目的でボレリアを大量培養し、ブタノール-水分配、並びにTriton X-114相分離法による表層蛋白質の分画を行った。ついで、各画分を電気泳動した後、膜ブロットを行い、水相画分中にビオチン化GalCerと反応する37kDa蛋白質(Gbp37)と67kDa蛋白質(Gbp67)を検出した。各蛋白質の気相シークエンサーによるN末端アミノ酸配列解析とホモロジー検索により、それぞれグリセルアルデヒド-3-リン酸脱水素酵素(GAPDH)ホモローグ、熱ショック蛋白質68(Hsp68)と相同性が高いことを明らかにした。B.burgdorferi s.s.297株gapdhホモローグのプロモーター領域を含む1.2kbのPCR増幅産物をpGEM-Tベクターに組み込み、抗Gbp37抗血清と反応する形質転換体3クローンを得た。これら組換え体クローンはGalCerに対するTLC結合試験において対照の大腸菌よりも高い結合能を示し、ボレリアのGAPDHホモローグがGbpであることを明らかにした。

研究成果

(24件)

すべてその他

すべて文献書誌 (24件)

[文献書誌] Masuzawa,T.et al.: "Negative finding in cross-protective activity of Japanese Borrelia isolates against infection with three species of Lyme disease Borrelia in outbred mice." Microbiol.Immunol.41. 733-736 (1997)
[文献書誌] 矢代加奈他: "慢性遊走性紅斑を伴ったライム病" 皮膚病診療. 19. 331-334 (1997)
[文献書誌] Wang,J.et al.: "Deletion in the genes encoding outer surface proteins OspA and OspB of Borrelia garinii isolated from patient in japan." Microbiol.Immunol.41. 673-679 (1997)
[文献書誌] Wang,J.et al.: "An unusual illegitimate recombination occurs in the linear-plasmid-encoded outer surface-protein A gene of Borrelia afzelii." Microbiology. 143. 3819-3825 (1997)
[文献書誌] Kaneda,K.et al.: "Identification of glycosphingolipid-binding protein of Borrelia burgdorferi sensu lato." Infect.Immun.65. 3180-3185 (1997)
[文献書誌] Masuzawa,T.et al.: "Genetic diversity of Borrelia burgdorferi sensu lato isolated in far eastern Russia." Microbiol.Immunol.41. 595-600 (1997)
[文献書誌] Masuzawa,T.et al.: "Homogeneity of Borrelia japonica and heterogeneity of Borrelia afzelii and “Borrelia tanukil" isolated in japan, determined from ospC gene sequences." FEMS Microbiol.Lett.153. 287-293 (1997)
[文献書誌] Wang,J.et al.: "Sequence analysis of OspA and OspB genes of Borrelia garinii isolated from patient in Japan and its evolutionary implications." FEMS Microbiol.Lett.154. 317-375 (1997)
[文献書誌] Kaneda,K.et al.: "Infectivity and arthritis induction of Borrelia japonica on SCID mice and immune competent mice : possible role of galactosylceramide binding activity on initiation of infection." Microbiol.Immunol.42. 173-175 (1998)
[文献書誌] 矢島あゆみ他: "刺し口の周囲にしびれ感を伴ったオーストラリア毒マダニ刺咬症の1例。" 皮膚. 40. 399-402 (1998)
[文献書誌] 矢野泰弘他: "マダニ幼虫の人体多数寄生に関する疫学的考察" 日本ダニ学会誌. 7. 145-148 (1998)
[文献書誌] Li.M.Q.et al.: "Lyme disease Borrelia species in Northeastern China resemble those isolated from far eastern Russia and Japan." Appl.Environ.Microbiol.64. 2705-2709 (1998)
[文献書誌] Takada,N.et al.: "Lyme disease spirochetes in ticks from northeastern China." J.Parasitol.83. 499-504 (1998)
[文献書誌] Masuzawa,T.et al.: "Determination of Borrelia afzelii-related group isolated from lxodes nipponensis in Korea as Borrelia valaisiana." Int.J.Syst.Bacteriol.(印刷中).
[文献書誌] 柳原保武他: "ライム病(ライムボレリア症)" 最新医学. 52. 37-45 (1997)
[文献書誌] 増澤俊幸: "日本のライム病実態の解明と病原体ボレリアの性状解析" 薬学雑誌. 117. 319-338 (1997)
[文献書誌] Yanagihara,Y.et al.: "Lyme disease (Lyme borreliosis)" FEMS Immunol.Med.Microbiol.18. 249-261 (1997)
[文献書誌] 柳原保武他: "特集 Emerging and Re-emerging Infectious Diseaseライム病(ライムボレリア症)" Pharma Medica. 16. 47-53 (1998)
[文献書誌] 増澤俊幸: "ライム病の診断" 感染症と化学療法. 4. 37-45 (1998)
[文献書誌] 増澤俊幸: "特集新興・再興感染症ライム病" CURRENT THERAPY. (印刷中).
[文献書誌] 増澤俊幸: "感染症とその治療-新しい視点から- (1) 細菌感染症「日本におけるライム病」" 最新医学. (印刷中).
[文献書誌] Masuzawa,T.et al.: "Die Erreger-Vorkommen und Klinische Relevanz" Biologische Analysensystem GmbH, 128 (1998)
[文献書誌] 増澤俊幸,柳原保武: "ライム病、エマージングディジーズ" 竹田美文,五十嵐章,小島荘明編集近代出版 (印刷中),
[文献書誌] 柳原保武,増澤俊幸: "ライム病(ライムボレリア症)ボレリア細菌学" 竹田美文,林英生編集朝倉書店 (印刷中),

1998 年度 実績報告書

ライム病ボレリア接着因子の機能解析とその応用

研究代表者

増澤 俊幸 静岡県立大学, 薬学部, 助教授 (10181645)

研究成果

[文献書誌] Masuzawa,T.et al.: "Negative finding in cross-protective activity of Japanese Borrelia isolates against infection with three species of Lyme disease Borrelia in outbred mice." Microbiol.Immunol.41. 733-736 (1997)

[文献書誌] 矢代加奈 他: "慢性遊走性紅斑を伴ったライム病" 皮膚病診療. 19. 331-334 (1997)

[文献書誌] Wang,J.et al.: "Deletion in the genes encoding outer surface proteins OspA and OspB of Borrelia garinii isolated from patient in japan." Microbiol.Immunol.41. 673-679 (1997)

[文献書誌] Wang,J.et al.: "An unusual illegitimate recombination occurs in the linear-plasmid-encoded outer surface-protein A gene of Borrelia afzelii." Microbiology. 143. 3819-3825 (1997)

[文献書誌] Kaneda,K.et al.: "Identification of glycosphingolipid-binding protein of Borrelia burgdorferi sensu lato." Infect.Immun.65. 3180-3185 (1997)

[文献書誌] Masuzawa,T.et al.: "Genetic diversity of Borrelia burgdorferi sensu lato isolated in far eastern Russia." Microbiol.Immunol.41. 595-600 (1997)

[文献書誌] Masuzawa,T.et al.: "Homogeneity of Borrelia japonica and heterogeneity of Borrelia afzelii and “Borrelia tanukil" isolated in japan, determined from ospC gene sequences." FEMS Microbiol.Lett.153. 287-293 (1997)

[文献書誌] Wang,J.et al.: "Sequence analysis of OspA and OspB genes of Borrelia garinii isolated from patient in Japan and its evolutionary implications." FEMS Microbiol.Lett.154. 317-375 (1997)

[文献書誌] Kaneda,K.et al.: "Infectivity and arthritis induction of Borrelia japonica on SCID mice and immune competent mice : possible role of galactosylceramide binding activity on initiation of infection." Microbiol.Immunol.42. 173-175 (1998)

[文献書誌] 矢島あゆみ 他: "刺し口の周囲にしびれ感を伴ったオーストラリア毒マダニ刺咬症の1例。" 皮膚. 40. 399-402 (1998)

[文献書誌] 矢野泰弘 他: "マダニ幼虫の人体多数寄生に関する疫学的考察" 日本ダニ学会誌. 7. 145-148 (1998)

[文献書誌] Li.M.Q.et al.: "Lyme disease Borrelia species in Northeastern China resemble those isolated from far eastern Russia and Japan." Appl.Environ.Microbiol.64. 2705-2709 (1998)

[文献書誌] Takada,N.et al.: "Lyme disease spirochetes in ticks from northeastern China." J.Parasitol.83. 499-504 (1998)

[文献書誌] Masuzawa,T.et al.: "Determination of Borrelia afzelii-related group isolated from lxodes nipponensis in Korea as Borrelia valaisiana." Int.J.Syst.Bacteriol.(印刷中).

[文献書誌] 柳原保武 他: "ライム病(ライムボレリア症)" 最新医学. 52. 37-45 (1997)

[文献書誌] 増澤俊幸: "日本のライム病実態の解明と病原体ボレリアの性状解析" 薬学雑誌. 117. 319-338 (1997)

[文献書誌] Yanagihara,Y.et al.: "Lyme disease (Lyme borreliosis)" FEMS Immunol.Med.Microbiol.18. 249-261 (1997)

[文献書誌] 柳原保武 他: "特集 Emerging and Re-emerging Infectious Diseaseライム病(ライムボレリア症)" Pharma Medica. 16. 47-53 (1998)

[文献書誌] 増澤俊幸: "ライム病の診断" 感染症と化学療法. 4. 37-45 (1998)

[文献書誌] 増澤俊幸: "特集 新興・再興感染症 ライム病" CURRENT THERAPY. (印刷中).

[文献書誌] 増澤俊幸: "感染症とその治療-新しい視点から- (1) 細菌感染症「日本におけるライム病」" 最新医学. (印刷中).

[文献書誌] Masuzawa,T.et al.: "Die Erreger-Vorkommen und Klinische Relevanz" Biologische Analysensystem GmbH, 128 (1998)

[文献書誌] 増澤俊幸,柳原保武: "ライム病、エマージングディジーズ" 竹田美文,五十嵐章,小島荘明 編集 近代出版 (印刷中),

[文献書誌] 柳原保武,増澤俊幸: "ライム病(ライムボレリア症)ボレリア 細菌学" 竹田美文,林 英生 編集 朝倉書店 (印刷中),

1998 年度実績報告書

増澤俊幸静岡県立大学, 薬学部, 助教授 (10181645)

[文献書誌] 矢代加奈他: "慢性遊走性紅斑を伴ったライム病" 皮膚病診療. 19. 331-334 (1997)

[文献書誌] 矢島あゆみ他: "刺し口の周囲にしびれ感を伴ったオーストラリア毒マダニ刺咬症の1例。" 皮膚. 40. 399-402 (1998)

[文献書誌] 矢野泰弘他: "マダニ幼虫の人体多数寄生に関する疫学的考察" 日本ダニ学会誌. 7. 145-148 (1998)

[文献書誌] 柳原保武他: "ライム病(ライムボレリア症)" 最新医学. 52. 37-45 (1997)

[文献書誌] 柳原保武他: "特集 Emerging and Re-emerging Infectious Diseaseライム病(ライムボレリア症)" Pharma Medica. 16. 47-53 (1998)

[文献書誌] 増澤俊幸: "特集新興・再興感染症ライム病" CURRENT THERAPY. (印刷中).

[文献書誌] 増澤俊幸,柳原保武: "ライム病、エマージングディジーズ" 竹田美文,五十嵐章,小島荘明編集近代出版 (印刷中),

[文献書誌] 柳原保武,増澤俊幸: "ライム病(ライムボレリア症)ボレリア細菌学" 竹田美文,林英生編集朝倉書店 (印刷中),