C型肝炎ウイルスNS3蛋白によるアポトーシスの抑制及びp53との相互作用の解析

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09670317
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 堀田 博 神戸大学, 医学部, 教授 (40116249)
• 研究分担者: 片山 友子 神戸大学, 医学部, 助手 (10224461) ; 石戸 聡 神戸大学, 医学部, 助手 (10273781)
• キーワード: C型肝炎ウイルス / NS3蛋白 / p53 / 癌抑制蛋白 / 複合体形成 / アポトーシス抑制

研究概要

C型肝炎ウイルスのNS3蛋白とp53がん抑制蛋白との複合体形成について検討した。抗NS3あるいは抗p53モノクローナル抗体を用いた免疫沈降法により、NS3全領域(NS3F)あるいはNS3のN末端2/3領域(NS3ΔC)とp53との共沈が観察された。一方、NS3ΔCのN末端174塩基を欠損するもの(NS3ΔNΔC)はp53と共沈しなかった。また、N末端28残基を欠くNS3ΔCは、NS4Aとは共沈しないが、p53とは共沈した。このことは、NS3ΔCとp53の共沈がNS4Aの存在下でもみられるという実験成績と符号していた。一方、p53のN末端39残基を欠失させた変異体はNS3と共沈するが、p53のC末端93残基を欠失させたものはNS3と共沈しなかった。以上の成績より、NS3はそのN末端に近い領域(aa1055-1200)を介して、P53のC末端(aa301-393)と結合し複合体を形成する可能性が示唆された。
さらに、p53応答性baxプロモーターをもつCATレポータープラスミドを用いて、p53のトランスアクチベーション活性に対するNS3の影響について検討したところ、NS3F及びNS3ΔCはp53の機能を部分的に抑制することが示された。一方、p53と結合しないNS3ΔNΔCでは、p53機能の抑制はみられなかった。
以上の成績より、NS3はp53と複合体を形成してそのがん抑制機能を抑制することにより、アポトーシスの抑制や細胞のがん化に関与している可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Song,Jian: "The NS5A protein of hepatitis C virus partially inhibits the antiviral activity of interferon." J.Gen.Virol.80(4). 879-886 (1999)
• [文献書誌] Sakugawa,Hioshi: "Novel variats of Heaptitis Delta virus genotype II predominantes in an endemic area, Okinawa, Japan." J.Med.Virol.(印刷中).
• [文献書誌] Ishido,Satoshi: "Complex formation of the nonstructural protein 3 of hepatitis C virus with the p53 tumor suppressor." FEBS Lett.438. 258-262 (1998)
• [文献書誌] Ishido,Satoshi: "Complex formation of NS5B with NS3 and NS4A proteins of hepatitis C virus." Biochem.Biophys.Res.Commun.244(1). 35-40 (1998)
• [文献書誌] Itoh,Masae: "Increased induction of apoptosis by a Sendai virus mutant is associated with attenuation of mouse pathogenicity." J.Virol.72(4). 2927-2934 (1998)
• [文献書誌] Katayama,Yuko: "Follow-up study of hypervariable region sequences of the hepatitis C virus genome in an infant with delayed anti-HCV antibody resposes." Microbiol.Immunol,. 42(1). 75-79 (1998)
• [文献書誌] Ishido,Sashido: "Methods in Molecular Medicine" The Humana Press, Inc.(印刷中),