癌化を念頭に入れたC型肝炎ウイルスなどの持続感染に対する治療モデルの構築

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09670498
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 愛知医科大学
• 研究代表者: 杉山 弘高 愛知医科大学, 医学部, 講師 (70242112)
• 研究分担者: 石川 哲也 愛知医科大学, 医学部, 助手 (10288508) ; 福澤 嘉孝 愛知医科大学, 医学部, 講師 (50218905) ; 各務 伸一 愛知医科大学, 医学部, 教授 (10115545)
• キーワード: HCV / HCC / 感染免疫 / 腫瘍免疫 / p53 / AFP / B7 / ribosome S6 kinase

研究概要

持続感染ウイルスや免疫抑制剤によって惹起される免疫抑制状態が腫瘍免疫の低下に関係していると考えてHCVと肝細胞癌をモデルにウイルスによる免疫機能の障害と腫瘍免疫との関わりを研究している。まず、B7・AFP・HCV・p53・ribosome S6 kinase各遺伝子を持つ発現ベクターを作成した。それぞれの遺伝子を肝細胞由来のHepal-6に導入して同系マウスに移植し、T細胞を中心に解析した。1)肝細胞癌を認識するT細胞株を樹立した。現在この癌抗原を精製している。2)HCVの遺伝子を肝細胞株とT細胞に導入してウイルス蛋白質の細胞内局在と表面抗原を観察した。アクセサリ分子とFasLの発現に注目して詳細を解析している。3)AFPは肝再生や肝細胞癌で上昇する。AFPを産生する肝癌細胞にB7遺伝子を導入して同系のC57/B6マウスに移植すると、野生株に比べて効率よくT細胞を誘導した。このCD8(+)CD28(+)キラーT細胞をクローン化してレセプターの一次構造を決定した。レセプターの新規修飾様式を解析している。また、B7-2を用いてヘルパー細胞の誘導に差異があるか検討中である。更にクローン化T細胞のAFP産生繊維芽細胞に対するキラー活性を解析している。AFPの抗原性と免疫抑制作用の両面から研究を続けている。4)p53は増殖抑制作用やアポトーシスに重要である。p53遺伝子を肝癌細胞に導入して腫瘍免疫に対する影響を検討している。5)上記T細胞と肝細胞の相互作用を検討する。6)自己免疫疾患への応用が検討されている第三の免疫抑制剤rapamycinの標的であるribosome S6 kinaseが細胞増殖を調節していることと癌細胞の増殖を抑制しアポトーシスを引き起こすことを報告した。この遺伝子や変異体を肝癌細胞に導入して腫瘍免疫への影響を解析することを計画している。

研究成果

• [文献書誌] Sugiayama,H.: "Overexpression of ribosomal S6 kinase interferes with cytokinesis" Oncogene. 15. 443-452 (1997)
• [文献書誌] Sugiyama,H.: "Perturbation of expression of Ca subnit of cAMP-dependent protein kinase inhibits IL2 production by T helper hybridoma cells" J.Immunology. 158. 171-179 (1997)
• [文献書誌] Sugiayama,H.: "Inhibition of growth and perturbation of cytokinesis by overexpression of p70 S6 kinase" FASEB Journal. 11. 1187-1187 (1997)
• [文献書誌] Yanagie,Y.: "Regulation of mouse immuno-responses by natural suppressor cell clone from bone marrow." Journal of Experimental Research. in press. (1998)
• [文献書誌] Kakumu S: "Serum levels of IL-10,IL-15,and soluble tumor necrosis factor-a receptors in type C chronic liver disease" Clinical and Experimental lmmunology. 109. 458-463 (1997)
• [文献書誌] Kakumu S: "Production of interleukins 10 and 12 by peripheral blood monomuclear cells(PBMC)in chronic hepatitis C virus(HCV)infection" Clinical and Experimental immunology. 108. 138-143 (1997)
• [文献書誌] Yoshioka K: "Humoral immune response to hypervariable region of hepatitis C virus deffers between genotype lb and 2a." Journal of Infectious Diseases. 175. 505-510 (1997)
• [文献書誌] 織田敏次: "肝臓病の原因と治療" PHP研究所, 280 (1997)