実験的多発性筋炎の発症機序の解析と免疫特異療法の試み

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09670682
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: (財)東京都神経科学総合研究所
• 研究代表者: 小島 崇 (財)東京都神経科学総合研究所, 神経病理研究部門, 主事研究員 (30225429)
• 研究分担者: 川添 陽子 (財)東京都神経科学総合研究所, 神経病理研究部門, 主事研究員 (60281705) ; 田沼 直之 (財)東京都神経科学総合研究所, 神経病理研究部門, 研究員 (00281676) ; 松本 陽 (財)東京都神経科学総合研究所, 神経病理研究部門, 副参事研究員 (90173921)
• キーワード: 多発性筋炎 / 筋炎惹起性T細胞 / T細胞レセプター / スペクトラタイピング / DNAワクチン

研究概要

骨格筋ミオシンをラットに免疫して多発性筋炎を作製し、炎症巣より単核球を分離した。型のごとくトータルRNAを分離し、RT-PCRでT細胞レセプターVβ1-20のいずれのサブファミリーが浸潤T細胞中に存在するかを確認した。さらに、CDR3 spectratypingを行い、T細胞レセプターのオリゴクロナリティを検定した。正常動物においては、特定のT細胞が増加することはないので、T細胞レセプターの遺伝子組み替えもランダムに起こる。従って、各Vβサブファミリーの変性ゲル中のバンドの数は5本から7本認められる。もし免疫疾患の発症に関連して、特定のVβを持ち、かつ特定の遺伝子組み替えを起こしたT細胞が増加しているような場合、この分析ではバンドの数が減少して、T細胞レセプターのオリゴクロナリティが認められることになる。その結果、Vβ8.2、Vβ10、Vβ12が筋炎特異的にクローン増加していることが明らかとなった。これらの多発性筋炎と関連するT細胞レセプターの候補遺伝子のバンドをゲルより切り出し、おのおのプラスミドに組み込んでクローニング後CDR3領域の塩基配列を解析中である。検索した個体数は多くはないが、自己免疫性筋炎においても自己免疫性脳脊髄炎で見られるような疾患特異的な共通配列が認められた。これらの所見に基づいて、特異免疫遺伝子療法を計画中である。

研究成果

• [文献書誌] T.Kohji et al.: "Interaction between apoptotic cells and reactive brain cells in the central nervous system of rats with autoimmune encephalomyelitis" J.Neuroimmunol.(in press). (1998)
• [文献書誌] G.Kim et al.: "CDR3 size spectratyping and sequencing of spectratype-derived T cell receptor of spinal cord T cells in autoimmune encephalomyelitis" J.Immunol.160. 509-513 (1998)
• [文献書誌] T.Kojima et al.: "Myosin-induced autoimmune polymyositis in the rats." J.Neurol.Sci.151. 141-147 (1997)
• [文献書誌] Matsumoto,Y.et al.: "Characterization of CD4-CD8- TCRab+ T cells appearing in the subarachnoid space of rats with autoimmune encephalomyelitis." Eur.J.Immunol.26. 1328-1334 (1996)
• [文献書誌] Tanuma,N.et al.: "Pretreatment with T cell receptor peptide using conventional immunization protocol does not induce effective protection against autoimmune" Cell.Immunol.168. 85-90 (1996)
• [文献書誌] Shin,T.et al.: "The subarachnoid space as a site for precursor T cell proliferation and effector T cell selection in experimental autoimmune encephalomyelitis." J.Neuroimmunol.56. 171-177 (1995)