QT延長症候群の遺伝子診断と異常チャネルの電気生理学的同定

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09670714
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 堀江 稔 京都大学, 医学研究科, 助手 (90183938)
• 研究分担者: 大谷 秀夫 京都大学, 医学研究科, 助手 (60293867)
• キーワード: QT延長症候群 / 心筋イオンチャネル / チャネル病 / 遺伝子 / 発現系 / PCR

研究概要

我々はQT延長症候群(LQTS)患者を対象に、ターゲット・チャネルとしてカリウム・チャネルをコードするK@@S2VLQT1@@E2(LQT1),hERG(LQT2)またナトリウム・チャネルをコードするSCN5A(LQT3)の各機能部分を挟む形でプライマーを作成してPCRで増幅し、PCR-SSCP法にてスクリーニングを行っている。本年度は、具体的な対象としてfamilial LQTSなどの家族性不整脈症候群とsecondary LQTS患者を選んだ。2次性のLQTS患者のなかにも、実はsubclinicalな遺伝子異常があり、徐脈や薬剤といったチャレンジを受ける結果、表現型としてのQT延長が出現するのではないかとの我々の仮定から研究対象に加えた。まずPCR-SSCP法による異常チャネルの同定については患者全血(5ml)から白血球を分離しゲノムDNAを採取する。上述のようにデザインされたプライマーを用いてPCRを行い、得られたcDNAをSSCPに供し、異常バンドの出現から個々の患者におけるチャネル異常の同定、さらにトポロジー・レベルで異常部位を想定した。さらにsequenceによる異常部位の決定を行った。本年度の検索で我々は、SSCPで異常を認めた家系の内、3例にKvLQT1の、また異なる3例にHERGの、さらに1例にSCN5Aのmissense mutationを発見した。その詳細については現在論文執筆中であり、99年3月の第63回日本循環器学会にて報告予定である。

研究成果

• [文献書誌] Tsuchiya K et al: "Functional communication between cardiac ATP sensitive K channel and Na/K ATPage" Journal of Cardiorase Electrophisical. 9. 415-422 (1998)
• [文献書誌] Ishida-Takahashi A et al.: "Cystic fihrosis transmembrane condictance regulater mediates sultonylines block of invardle-reactivity K^+ Channel" J.of Phisiol. 508. 23-30 (1998)
• [文献書誌] Mukai E et al.: "Metabolic inhibition imparis ATP-sensitive K channel block by sulfonylures in panciated β cells" Amer J Physiol. 274. E38-E44 (1998)
• [文献書誌] Ai T et al: "Accentusted antagonism by angistenoin II on Cardia C type ca-currents by β-adenetric stimlation." Pflugers Archiv. 436. 168-174 (1998)
• [文献書誌] Takano M et al.: "Cytoplasmic terminus domeins of Kir6 × carfer different nucleotide-depended on the ATP sensitive K channel" J of Physiol. 512. 395-400 (1998)
• [文献書誌] Ai T et al: "Successful Rf current ablation b acsessoy pathway after tricuspid replacement in Elastin's anomalmy" Jpn Circulation J. 62. 791-793 (1998)
• [文献書誌] Mukai E et al: "The antianlinglmic agent cibergeline inhibits KATP channels by binding to Kir 6.2" Biochem Biophysic Res Commun. 251. 477-481 (1998)
• [文献書誌] Washizuka T.: "Protein Tyrosine Kinase activity does not mediate genistein inhibition of cardiac delayed-rectifion K currents" J.Mole Cellular Cardiology. 30. 2579-2590 (1998)
• [文献書誌] Haruna T.: "Coodinate interaction between ATP-senoitive,K channel and Na/K ATPase modulation ischemic preconditioning" Circulation. 98. 2905-2910 (1998)
• [文献書誌] Horie,M et al.: "Long QT syndrome as a cause of cardiac sudden death" Recent Advances in Heart Failture,