| 研究概要 |
赤血球分化の仕組を理解するために,血球分化に関与すると思われる組織・細胞系列特異的な転写因子の発現を解析することが本研究の目的である。
1.赤血球分化に重要な役割を果たすと考えられる転写因子は、GATA因子群、NF-E2因子群が知られているが、NF-E2因子群についてはまだ赤血球分化に中心的な役割を果たす転写因子が同定されていない。そこでまだ単離されていないNF-E2関連因子群のヒトcDNAクローニングを行った。
我々は、まずマウスBach1,Bach2 cDNAをプローブとして数種類のヒトcDNAライブラリーから各々のcDNAクローンを単離した。5'RACEを行い完全長のcDNAを得た。血球系細胞での発現をノーザンブロットで解析したところ、Bach1は赤血球系・巨核球系細胞で特に大量に発現していることが明らかとなった。この結果よりBach1は赤血球系の細胞で重要な役割を果たしている可能性が高いことが強く推定されたため、RT-PCR法で発現を解析するための条件を決定した。
さらにまだ単離されていないNF-E2因子の小サブユニットの一つであるmafFのヒトcDNAクローニングを行うため、数種類のヒトcDNAライブラリーをスクリーニングしたが現在のところ目的のcDNAは得られていない。
2.末梢血単核球より、免疫磁気ビーズ法で大量にCD34陽性細胞を分離し、液体培養で赤血球系と巨核球系にそれぞれ分化成熟させた。現在GATA-1,GATA-2,p45NF-E2,Nrf1,Nrf2,Bach1,mafK,mafGの発現パターンを解析中である。
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