| 研究概要 |
1. 対象および方法;鶏卵アレルギーが疑われたアトピー性皮膚炎を対象に、鶏卵負荷試験を施行し、末梢血リンパ球・単核球(PBMCs)を用いて、ovalbumin(OA)刺激リンパ球増殖反応、cutaneous lymphocyte-associated antigen(CLA)発現、細胞内サイトカイン産生をフローサイトメトリー(FACScan)で測定した。
2. 結果;
(1) 食物抗原刺激リンパ球増殖反応
年齢による検討では2歳未満までは低年齢ほど、卵白特異的IgE抗体値による検討ではスコア3以上で、S.1.がそれぞれ高値を示した。また、卵白負荷試験陽性例では、陰性例に比べ有意に増殖反応が認められた。
(2) 感作Tリンパ球の臓器特異性
OAで増殖反応を示したリンパ球は、卵白負荷試験陽性例でCLA発現が増強していたが、陰性例では、CLA発現の増強は認められなかった。よって、OA刺激で感作されたTリンパ球は、臓器特異性を持つに至った。
(3) 細胞内サイトカイン産生
IFN-γ産生は健康児と有意差がなかったが、IL-4産生が有意に亢進していた。また、鶏卵除去療法により卵白特異的IgE抗体に変化がみられないうちに、IFN-γ産生は増加していった。
3. 結論;鶏卵アレルギーのあるアトピー性皮膚炎の患児では、卵白抗原のOA刺激により末梢リンパ球は増殖反応を示し、増殖した細胞ではCLA発現も増強していた。また、実際の鶏卵負荷試験とも一致しており、in vitroでの食物アレルギーの診断が可能であった。また、鶏卵除去療法により、サイトカイン産生に変化が認められ、細胞内サイトカイン産生の測定は、卵白特異的IgE抗体よりも、除去療法の早期の指標に有用であると考えられた。
4. 今後の展開;細胞表面抗原を同時染色し、リンパ球のどのsubpopulation(CD4+あるいはCD8+)が増殖反応をしているのかフローサイトメトリーにより検討している。また、CLA発現、サイトカイン産生についても、CD4+あるいはCD8+のsubpopulationで反応に差があるかどうかを検討している。現在、IL-5,IFN-γ,IL-4,IL-10のmRNA発現をリンパ球レベルで解析しているが、assay上の問題をクリアする必要が残っている。
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