1998 年度実績報告書

変異オルニチントランスカルバミラーゼのミトコンドリア局在化の分子機構

研究課題

研究課題/領域番号	09670854
研究機関	久留米大学
研究代表者	芳野信久留米大学, 医学部, 教授 (40080569)
研究分担者	西依淳久留米大学, 医学部, 助手 (30218226)
キーワード	オルニチントランスカルバミラーゼ / ミトコンドリア / 転送
研究概要	1. OTCcDNAのin vitroでの転写・翻訳の条件の検討既報に従い調製したプレシークエンスを含む野生型OTCcDNAをT7ポリメラーゼプロモーターを持つベクターに組込んだものを大腸菌JM83にtransfectionして培養後、常法にしたがってプラスミドを分離した。なお、以下の実験には、得られたプラスミドDNAを70%エタノール沈殿処理を1回行ったものを使用した。このプラスミドの種々の量を、5X転写用バッファー、rNTPs.RNAポリメラーゼ、20X翻訳バッファー、ウサギ網状赤血球溶血液、^<35>S-メチオニンからなる反応系内で転写、翻訳を行わせた。翻訳産物を8%SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動で分離し、1-3時間exposeした。この結果、転写・翻訳産物の収量は実験ごとにかなりのばらつきが認められ、転送実験に利用できるに至らなかった。 2.今後の課題 1) 転写・翻訳産物の収量のばらつきの原因がプラスミドの精製度の違いによるのか、転写系への添加量の問題か、あるいはそれ以外の要因が関係しているかの検討を行う予定である。 2) 上記の問題が解決したら、ついでミトコンドリアへの放射活性の取り込みの総量を指標として転送の至適条件を決め、ついで各分子量別の分画への取り込みの検討に移りたい。 3) 野生型OTCcDNAで以上の条件を検討したのち、R40HcDNAなどの変異OTCcDNAにつき同様の系で検討を行う。

研究成果
(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Nishiyori A,et al.: "Y55D mutation in ornithine transcarbamylase associated with late-onset hyperammonemia in a male." Hum Mutat. S1. S131-S133 (1998)
[文献書誌] Koga Y,et al.: "Maple syrup urine disease : nutritional management by intravenous hyperalim entation and uneventful course after surgicak repair of dislocation of the hip." J Inher Metab Dis. 21. 177-178 (1998)
[文献書誌] Yano S,et al.: "Townes-Brocks syndrome associated with Pendred syndrome." Am J Med Genet. 77. 330-331 (1998)
[文献書誌] Kimura A,et al.: "Diagnosis of the first Japansese patient with 3-oxo-delta4-steroid 5beta reductase deficiency by use of immunoblot analysis." Eur J Pediatr. 157. 386-390 (1998)
[文献書誌] Koga Y,et al.: "MELAS exhibits dominant negative effecs on mitochondrial RNA processing." Ann Neurol. 78. 835-only (1998)
[文献書誌] Nezu J,et al.: "Primary systemic carnitine deficiency is caused by mutations in a gene encoding sodium ion-dependent carnitine transporter." Nature Genetics. 21. 91-94 (1999)
[文献書誌] Yoshino M,et al.: ":Management of acute metabolic decompensation in maple syrup urine disease : A multi-center study." Pediatrics International. (in press). (1999)
[文献書誌] 芳野信: "高アンモニア血症" 小児内科. 31巻増刊号(印刷中). (1999)

1998 年度 実績報告書

変異オルニチントランスカルバミラーゼのミトコンドリア局在化の分子機構

研究代表者

芳野 信 久留米大学, 医学部, 教授 (40080569)

研究成果

[文献書誌] Nishiyori A,et al.: "Y55D mutation in ornithine transcarbamylase associated with late-onset hyperammonemia in a male." Hum Mutat. S1. S131-S133 (1998)

[文献書誌] Koga Y,et al.: "Maple syrup urine disease : nutritional management by intravenous hyperalim entation and uneventful course after surgicak repair of dislocation of the hip." J Inher Metab Dis. 21. 177-178 (1998)

[文献書誌] Yano S,et al.: "Townes-Brocks syndrome associated with Pendred syndrome." Am J Med Genet. 77. 330-331 (1998)

[文献書誌] Kimura A,et al.: "Diagnosis of the first Japansese patient with 3-oxo-delta4-steroid 5beta reductase deficiency by use of immunoblot analysis." Eur J Pediatr. 157. 386-390 (1998)

[文献書誌] Koga Y,et al.: "MELAS exhibits dominant negative effecs on mitochondrial RNA processing." Ann Neurol. 78. 835-only (1998)

[文献書誌] Nezu J,et al.: "Primary systemic carnitine deficiency is caused by mutations in a gene encoding sodium ion-dependent carnitine transporter." Nature Genetics. 21. 91-94 (1999)

[文献書誌] Yoshino M,et al.: ":Management of acute metabolic decompensation in maple syrup urine disease : A multi-center study." Pediatrics International. (in press). (1999)

[文献書誌] 芳野 信: "高アンモニア血症" 小児内科. 31巻増刊号(印刷中). (1999)

1998 年度実績報告書

芳野信久留米大学, 医学部, 教授 (40080569)

[文献書誌] 芳野信: "高アンモニア血症" 小児内科. 31巻増刊号(印刷中). (1999)