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ヒト副甲状腺ホルモン関連ペプチド(PTHrP)遺伝子に存在するビタミンD抑制性DNAエレメント(nVDRE)はいわゆるダイレクトレピ-トのhalf siteのみを持ち、PTHやその他の、ビタミンDによって負の転写制御を受ける遺伝子にも広く認められる。私はこのDNA配列(nVDRE_<RP>)および相同の配列を2個持ち、ビタミンDによって転写促進を受けるラットオステオポンチンのVDRE(VDREop)を合成し、以下の結果を得た。
1)VDREopは、PTHrP遺伝子が内因性に発現されているリンパ球(MT2)細胞において、VDRとRXRαとの複合体を作り、ビタミンDによる転写促進を媒介するが、nVDRE_<RP>には、VDRとKu抗原が別個の部位に結合しビタミンDによる転写抑制が起こる。この時RXRαは関与しない。
2)サウスウェスタン法およびイミュノデプリーション法によると、VDRモノマーはnVDRE_<RP>と結合するがVDREopとは結合しない。
3)nVDRE_<RP>とVDRの結合はビタミンDによって抑制され、この抑制は脱燐酸化酵素処理で解除されることからビタミンDによるVDRの燐酸化がこの現象に関与する可能性がある。
4)Ku抗原によって、糖質コルチコイドによる転写促進が抑制される系が知られており、その抑制にはKu抗原のregulatory unitのDNA結合を介してリクルートされるDNA依存性蛋白キナーゼ(DNA-PK)による糖質コルチコイド受容体の燐酸化が関与している。VDRにもDNA-PKの基質モチーフが種を越えて保存されていることから、1リピート型のnVDREの異なる部位に結合するVDRおよびKu抗原の相互作用が、ビタミンDによる転写抑制機構の一つとして考えられる。
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